兩株產(chǎn)乳酸芽胞桿菌的鑒定、培養(yǎng)基優(yōu)化及其對肉雞部分微生態(tài)效應(yīng)的研究.pdf

1、本試驗選取了兩株產(chǎn)乳酸芽胞桿菌BLZ01和SPL01，用試劑盒測定乳酸類型，并根據(jù)細菌菌落形態(tài)和生理生化特征對BLZ01和SPL01進行初步的鑒定，再結(jié)合16SrRNA測序結(jié)果鑒定該兩株芽胞桿菌。通過單因素試驗，對它們的培養(yǎng)基進行了初步的優(yōu)化。采用動物試驗，研究它們對肉雞生長性能、屠宰性能、部分免疫指標(biāo)及腸道菌群數(shù)量和多樣性的影響。試驗主要內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　1.通過對細菌培養(yǎng)、革蘭染色，對BLZ01和SPL01進行形態(tài)學(xué)分析。

2、再結(jié)合它們各自的生理生化特征及16S rRNA分析。結(jié)果，BLZ01被鑒定為產(chǎn)左旋乳酸的巨大芽胞桿菌（Bacillus megaterium），SPL01為產(chǎn)乳酸的蠟樣芽胞桿菌（Bacillus cereus）。
　　2.使用單因素試驗，運用生產(chǎn)中經(jīng)常使用的發(fā)酵原材料，把BLZ01與SPL01的培養(yǎng)基進行初步優(yōu)化。結(jié)果，芽胞桿菌BLZ01的最佳培養(yǎng)基為:葡萄糖10g/L，玉米粉10g/L，黃豆粉15g/L，菜籽粕5g/L，魚粉10

3、 g/L，尿素2 g/L，碳酸鈣2g/L，氯化鈉5g/L， MgSO40.2 g/L，pH為7.2～7.5。芽胞桿菌SPL01的最佳培養(yǎng)基為:葡萄糖10g/L，玉米粉10 g/L，黃豆粉10g/L，菜籽粕5g/L，魚粉10g/L，尿素2g/L，碳酸鈣5 g/L，氯化鈉5g/L，MgSO40.5 g/L。
　　3.選取150羽7日齡肉雞進行試驗，隨機分成5組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)10只。其中A為對照組，飼喂基礎(chǔ)日糧;B組飼喂基礎(chǔ)日

4、糧添加0.05％巨大芽胞桿菌BLZ01菌粉;C組飼喂基礎(chǔ)日糧添加0.05％蠟樣芽胞桿菌SPL01菌粉;D組飼喂基礎(chǔ)日糧添加0.05％巨大芽胞桿菌BLZ01菌粉和0.05％蠟樣芽胞桿菌SPL01菌粉;E組飼喂基礎(chǔ)日糧添加0.1％添加巨大芽胞桿菌BLZ01菌粉和0.1％蠟樣芽胞桿菌SPL01菌粉。
　　(1)生長性能:在平均日增重方面，四個試驗組均顯著性高于對照組(P＜0.05)，雖然復(fù)合活菌制劑D組和E組均高于單菌制劑B組和C組，但

5、差異不顯著(P＞0.05)。在料重比方面，四個試驗組均低于對照組。在屠宰性能方面，四個試驗組的凈膛率、胸肌率和腿肌率均顯著性高于對照組(P＜0.05)，且復(fù)合活菌制劑D組的胸肌率均顯著性高于B組和C組(P＜0.05)，且復(fù)合活菌制劑E組的屠宰率、腿肌率均顯著性高于B組和C組(P＜0.05)。在基礎(chǔ)日糧中添加BLZ01和SPL01菌粉均能顯著性提高肉雞的增重及屠宰性能，且能降低料重比，同時BLZ01和SPL01的復(fù)合活菌制劑效果更優(yōu)于它們

6、各自的單菌制劑效果。
　　(2)肉雞免疫性能:雖然BLZ01和SPL01能提高部分肉雞的免疫器官指數(shù)和新城疫抗體效價，但我們認為它們不具有顯著性提高肉雞免疫功能的作用。
　　(3)肉雞腸道菌群:四個試驗組回腸的乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量均高于對照組，除C組乳酸桿菌差異不顯著(P＞0.05)，其它組差異均顯著(P＜0.05);盲腸中乳酸菌數(shù)量高于對照組，但差異不顯著(P＞0.05)。四個試驗組回腸、盲腸的大腸桿菌和腸球菌數(shù)量均有所

7、下降，且存在顯著性差異(P＜0.05)。說明BLZ01和SPL01具有促進肉雞腸道中乳酸桿菌和雙歧桿菌有益菌生長的作用，同時抑制大腸桿菌等病原菌的繁殖。
　　(4) PCR-DGGE結(jié)果:通過Quantity one軟件分析發(fā)現(xiàn)，肉雞回腸、盲腸中均存在各自的特異性菌群，且存在較大的差異，即使飼喂BLZ01和SPL01均不能改變這種差異。在基礎(chǔ)日糧中添加BLZ01和SPL01可使肉雞回腸、盲腸的腸道菌群種類發(fā)生了較大的變化，且腸道菌