維生素E琥珀酸酯對(duì)NB4細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響.pdf

1、目的:
　　檢測(cè)在維生素E琥珀酸酯(VES)對(duì)急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株NB4細(xì)胞增殖分化及RAR-α蛋白表達(dá)水平的作用。
　　方法:
　　1.細(xì)胞增殖的測(cè)定:取體外培養(yǎng)的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株——NB4細(xì)胞，分別應(yīng)用10μmol/L，20μmol/L，30μmol/L，40μmol/L維生素E琥珀酸酯處理NB4細(xì)胞72小時(shí)，收集細(xì)胞并應(yīng)用臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)算細(xì)胞存活率。
　　2.細(xì)胞分化的測(cè)定:取體外培

2、養(yǎng)的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株——NB4細(xì)胞，分別應(yīng)用10μmol/L，20μmol/L，30μmol/L，40μmol/L維生素E琥珀酸酯處理NB4細(xì)胞72小時(shí)，收集細(xì)胞并應(yīng)用NBT還原實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞分化情況。
　　3.RAR-α蛋白測(cè)定:應(yīng)用Westernblot方法。上述對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期NB4細(xì)胞分別經(jīng)VES(20μmol/L)、ATRA(1μmol/L)、VES(20μmol/L)聯(lián)合ATRA(1μmol/L)處理48小

3、時(shí)，并設(shè)空白對(duì)照組;收集細(xì)胞，提取蛋白質(zhì)后測(cè)定RAR-α蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.維生素E琥珀酸酯對(duì)NB4細(xì)胞增殖的影響:應(yīng)用10μmol/L，20μmol/L，30μmol/L，40μmol/L維生素E琥珀酸酯處理NB4細(xì)胞72小時(shí)，活細(xì)胞比率分別為89.13％、90.85％、73.95％、72.79％
　　2.維生素E琥珀酸酯對(duì)NB4細(xì)胞分化的影響:用10μmol/L，20μmol/L，30μmol/L，

4、40μmol/L維生素E琥珀酸酯處理NB4細(xì)胞72小時(shí)，并設(shè)置空白對(duì)照組。其NBT陽性比率分別為21.17％、27.33％、9.50％、6.00％;對(duì)照組NBT陽性比率為1.67％。
　　3.維生素E琥珀酸酯對(duì)NB4細(xì)胞RAR-α蛋白表達(dá)的影響:聯(lián)用VES(20μmol/L)及ATRA(1μmol/L)組48小時(shí)后PML/RAR-α融合蛋白總量較單用ATRA(1μmol/L)組增加，單用VES（20μmol/L）組及聯(lián)用VES(2