結(jié)核分枝桿菌DNA修復(fù)fpg基因克隆表達(dá)及性質(zhì)研究.pdf

1、目前結(jié)核病仍然是全球人類健康的主要威脅，原發(fā)性耐藥在耐藥結(jié)核病產(chǎn)生中占主導(dǎo)地位[1，2]。全球約有17-20億的人感染結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis，即結(jié)核菌或M.tuberculosis)，病人約有2000萬，每年感染M.tuberculosis的患者有約3000萬，在800萬的新患者中，約200萬死于該病[3]。近幾年間，我們不斷加大結(jié)核病，瘧疾以及艾滋病這三大疾病的處理力度，在世界衛(wèi)生組織公布的

2、22個限制結(jié)核控制成效的高負(fù)擔(dān)國中，中國和印度已成為結(jié)核病最多的兩個國家。M.tuberculosis的潛伏感染直接導(dǎo)致了結(jié)核病治療療程長，療效差，以及化療后易復(fù)發(fā)等，因?yàn)榀煶涕L，不能負(fù)擔(dān)所需的醫(yī)療費(fèi)用，病人不能充分化療，這也是結(jié)核病高復(fù)發(fā)率及耐藥病例增多的原因，同時也是結(jié)核病難治愈的原因[4，5]。
　　 維持基因組穩(wěn)定是生物生存的基礎(chǔ)。堿基切除修復(fù)(Base Excision Repair，BER)是DNA修復(fù)的主要方式之一

3、。堿基切除修復(fù)對結(jié)核分枝桿菌等胞內(nèi)致病菌尤其重要。fpg是堿基切除修復(fù)的關(guān)鍵酶。通過比較分枝桿菌的基因組，發(fā)現(xiàn)結(jié)核菌較其他非致病分枝桿菌普遍具有堿基切除修復(fù)基因。這提示堿基切除修復(fù)可能與結(jié)核菌在宿主體內(nèi)存活和致病有關(guān)。這條途徑也許是新結(jié)核病藥物研發(fā)的重要靶標(biāo)。
　　 本研究針對此現(xiàn)狀，在大腸桿菌中克隆表達(dá)結(jié)核分枝桿菌H37Rv-fpg，再經(jīng)IPTG誘導(dǎo)，Ni2+ Sepharose純化重組蛋白，針對該蛋白開展進(jìn)一步的研究，以期得