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文檔簡介
1、目的:
氯乙烯(VCM)是一種已知的致癌劑,其作為一種遺傳毒物,能夠造成DNA損傷,從而啟動(dòng)細(xì)胞周期G1/S關(guān)卡功能,使細(xì)胞阻滯于G1期。本研究擬圍繞G1/S關(guān)卡相關(guān)調(diào)控因子蛋白表達(dá)水平的變化,探討VCM對細(xì)胞周期G1/S關(guān)卡功能的影響及VCM可能的致癌機(jī)制。
方法:
將人正常肝細(xì)胞HL-7702暴露于VCM氣體(體積分?jǐn)?shù)為0.8%,2.5%,7.5%,15%和30%)和空氣(對照組)48h后,
2、光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)變化;用流式細(xì)胞儀檢測HL-7702的細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡情況;western blotting測定細(xì)胞中G1/S關(guān)卡相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。使用SPSS16.0軟件建立數(shù)據(jù)庫并進(jìn)行ANOVA方差分析。
結(jié)果:
1)人正常肝細(xì)胞HL-7702染毒48小時(shí)后細(xì)胞貼壁減少,死細(xì)胞增多。
2)染毒48h后,在低于7.5%組范圍內(nèi),G0/G1期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)隨著染毒劑量的增加呈現(xiàn)上升的趨
3、勢,7.5%組與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);S期2.5%組與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3)在染毒劑量低于7.5%組范圍內(nèi),隨著染毒劑量的增加,cyclinA和CDK2蛋白的表達(dá)量呈上升趨勢,7.5%和15%組分別與對照組相比差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); CDK4、P53和P16蛋白表達(dá)量均呈上升趨勢,7.5%組與對照組相比差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);cyclinE在7.5
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