結核分枝桿菌H37Ra和卡介苗感染小鼠及巨噬細胞的研究.pdf

1、　　目的：1.了解結核分枝桿菌H37Ra和卡介苗(BCG)免疫小鼠后細菌在小鼠體內的定植，及誘導小鼠產生的特異性細胞免疫應答。2.探討H37Ra和BCG誘導巨噬細胞產生一氧化氮(NO)的能力，以及細菌在巨噬細胞內生存的能力和破壞巨噬細胞的能力。　　方法：1.將H37Ra和BCG分別皮內接種BALB/c小鼠，免疫15d、30d及60d后，取稀釋小鼠脾臟和肺臟勻漿接種羅氏培養(yǎng)基，培養(yǎng)18d后計CFU(菌落形成單位)；免疫30d和60d后，

2、取小鼠脾淋巴細胞體外培養(yǎng)并用PPD刺激，MTT法檢測脾淋巴細胞轉化試驗，ELISA法檢測培養(yǎng)上清液中IFN-γ的產量。2.H37Ra和BCG分別感染BALB/c小鼠腹腔巨噬細胞、RAW264.7細胞株及THP-1細胞株，24h后取培養(yǎng)上清液，Griess法檢測NO的釋放量；分別于感染后的0、4d及7d用1﹪TritonX-100裂解巨噬細胞后接種羅氏培養(yǎng)基，培養(yǎng)18d后計CFU；同時于每個時間點，用MTT法檢測巨噬細胞存活率的變化?！?/p>