比較基因組雜交在食管癌細(xì)胞遺傳學(xué)研究中的應(yīng)用.pdf

1、—— 一U _ 隴捌醫(yī)i ：} 厶1 1 l 殛土：：t 位論塹 一比較基因組雜交在食管癌細(xì)胞遺傳學(xué)研究中的應(yīng)用碩士研究生：劉顥導(dǎo)師：呂寧王明榮中I 圳醫(yī)學(xué)科學(xué)院中困協(xié)和醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院病理科分子腫瘤學(xué)國家重點實驗室北京( 1 0 0 0 2 1 )中文摘要{ 食管癌足人類常見的惡性腫瘤之一，位居我圍十人癌疝，E 亡的第p U 俯。食管癌流行病學(xué)調(diào)查顯示，遺傳岡索在食管癌發(fā)生中起卷蘿要的作_ f _ } j 。t - L Y ．2基【列

2、組雜交技術(shù)從整體卜分析遺傳物質(zhì)改變，與傳統(tǒng)細(xì)J 】( ! 』遺傳技術(shù)柏比，能力‘使地探洲i } j 全基岡組任何一處D N A 的異常擴增和缺失。’，本研究通過! ! 披驁固組雜交技術(shù)分析1 7 例壘筻垣．組織和兩例食管砘i細(xì)胞系，獲得食管癌的細(xì)胞遺傳學(xué)資料，旨在鑒定陔病非隨機的染色體D X A擴增與缺失。力濁：提取待測的腫瘤標(biāo)本及對照標(biāo)本的基凼組D N A ，制作分別帶自小同標(biāo)記物的探針，同時與正常人中期染色體雜交。雜交結(jié)果通過不矧的

3、熒光抗體進行信號放大，用熒光顯微鏡檢測。雜交信號被轉(zhuǎn)換為數(shù)字格式經(jīng)專用軟件分析，獲得沿染色體縱軸的兩種熒光雜交信號的比值，從而揭示待測標(biāo)本基因組D N A 拷貝數(shù)的變化。良驗結(jié)果顯示：所有病例均存在染色體特定位點的擴增或缺失。其中D N A 拷貝數(shù)明顯擴增的位點出現(xiàn)在3 q ( 1 2 ／1 9 ) ，5 p ( 8 ／1 9 ) 和8 q ( 8 ／1 9 ) 。其它出現(xiàn)較多的擴增位點包括9 q ( 4 ／1 9 ) ，1 3 q (

4、 3 ／1 9 ) ，1 6 q ( 6 ／1 9 ) 和1 9 p( 4 ／1 9 ) 。D N A 缺失位點有1 4 q ( 2 ／1 9 ) 和1 8 q ( 2 ／1 9 ) 。， 一結(jié)論：食管癌存在非隨機的D N a 拷貝數(shù)擴增和D N A 拷貝數(shù)減少的染色體位點，提示這些位點可能含有食管癌相關(guān)的候選原癌基因和抑癌基兇。fc ] ! 國世J ：盈』醫(yī)型厶。芏』丑j ：：芏位．瞼童文獻綜述頻譜染色體組型( S K Y ) 及其在

5、腫瘤細(xì)胞遺傳學(xué)中的應(yīng)用中圍醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院 劉顥 千明榮 I [ j 7 j熒光原位雜交較染色體組型分析而苦具有更高的靈敏‘P j i ，特異’n - 和分辨：缸。f ¨由于具有光譜上不重霍性的熒光染料數(shù)曰彳丁限，從m 不能刪州j { j 小| 【| _ 1顏色分辨所有的人類染色體。S c h r o c k 等在1 9 9 6 q ：介紹了多色頻潛染乜體糾l ，弘療法，做到了，在 次雜交當(dāng)中用不同顏色分辨所有的人類或其它種

6、屬的染也體。該力‘法結(jié)合廠傅立I J | ．頻譜，電荷偶合設(shè)備成像，和光學(xué)5 a 微療法，M I I , J¨帶樣木杓：可見光和近紅外范圍內(nèi)所有點的發(fā)射頻譜，從1 山i t J 以允許使} 1 j 多個頻譜承費的探針。頻譜染色體組型( S K Y ) 的原理過去傳統(tǒng)的單色熒光顯微方法，為了區(qū)分熒光染料，是通過 個熒光染利特異的光學(xué)濾鏡來測量其熒光強度；多色頻譜染色體組掣方法則允許發(fā)射光譜的所有信息都得到利用。其原理是：標(biāo)~ 己