原發(fā)性乳腺癌組織中類干細(xì)胞檢測(cè)及其臨床意義.pdf

1、目的：乳腺癌是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在我國(guó)其發(fā)病率正在逐年上升，且發(fā)病年齡正在趨向年輕化，盡管目前的綜合治療方法顯著改善了患者的生存期，但乳腺癌的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)仍然很高。目前越來(lái)越多的證據(jù)顯示，腫瘤組織中腫瘤干細(xì)胞的存在及數(shù)量是腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的根源，并且對(duì)判斷病情進(jìn)展和預(yù)后具有重要參考價(jià)值。但腫瘤干細(xì)胞缺乏特異的標(biāo)志物對(duì)其檢測(cè)，最近國(guó)外的研究發(fā)現(xiàn)，CD55可以作為乳腺癌干細(xì)胞的標(biāo)志物，并可作為判斷病情進(jìn)展?fàn)顩r和預(yù)后的重要參考指標(biāo)。本

2、實(shí)驗(yàn)擬采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)乳腺癌組織中乳腺癌干細(xì)胞（Mammary Cancer Stem Cells MCSC）的存在及比例，并分析其與臨床病理因素：臨床分期、病理類型、腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及受體試驗(yàn)結(jié)果（C-erbB2、ER、PR），Ki67的關(guān)系，探討CD55高表達(dá)（CD55hig）與乳腺癌預(yù)后的關(guān)系，為臨床上對(duì)乳腺癌患者的病情估計(jì)、預(yù)后判斷及指導(dǎo)乳腺癌的合理治療提供一定理論依據(jù)。
　　 方法：選取2008年2月至2009年1月

3、在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院外一科診治的乳腺癌患者45例，年齡30～72歲，中位年齡46歲。其中8例曾行過(guò)術(shù)前新輔助化療，其余為首次就診、未經(jīng)過(guò)任何治療的病人。其中根據(jù)腋淋巴結(jié)有無(wú)轉(zhuǎn)移分為：無(wú)轉(zhuǎn)移者16例，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移1-3枚16例，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移≥4枚13例；根據(jù)病理類型分為：浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌33例，浸潤(rùn)性小葉癌7例，其他類型乳腺癌5例；根據(jù)臨床分期分為：Ⅰ期11例，Ⅱ期26例，Ⅲ期8例；根據(jù)C-erbB2表達(dá)情況分為：陽(yáng)性（+～+++）患者33例，

4、陰性（-）患者12例；根據(jù)ER表達(dá)情況分為：陽(yáng)性（+～+++）患者30例，陰性（-）患者15例；根據(jù)PR表達(dá)情況分為：陽(yáng)性（+～++）患者26例，陰性（-）患者19例；根據(jù)Ki67表達(dá)情況分為：陽(yáng)性（+～+++）患者32例，陰性（-）患者13例。
　　 本試驗(yàn)采用CD55，CK19雙抗對(duì)原發(fā)性乳腺癌單細(xì)胞懸液進(jìn)行免疫熒光標(biāo)記，以流式細(xì)胞學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè)，取超出相對(duì)應(yīng)的腫瘤5厘米的非癌乳腺組織作為免疫熒光標(biāo)記時(shí)的陰性對(duì)照，檢測(cè)中以乳

5、腺癌細(xì)胞株所測(cè)的CD55hig的熒光密度值為界（本研究采用MDA-MB-231細(xì)胞株進(jìn)行CD55檢測(cè)，以此癌細(xì)胞表面受體大量結(jié)合CD55抗體的主峰處的熒光密度值為界值，超出此界值即為CD55hig），設(shè)門分析，獲取門內(nèi)CD55高表達(dá)（CD55hig）群細(xì)胞的比例。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用Expo32 ADC軟件進(jìn)行分析，得到CD55高表達(dá)群細(xì)胞的比例。
　　 結(jié)合患者的臨床資料、病理類型、腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況及C-erbB2等因素進(jìn)行相關(guān)分析。腫

6、瘤的各項(xiàng)病理指標(biāo)根據(jù)我院組織活檢和手術(shù)標(biāo)本的病理報(bào)告確定，患者的臨床資料來(lái)自住院病歷。
　　 統(tǒng)計(jì)分析運(yùn)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以x±S表示。兩個(gè)樣本均數(shù)的比較應(yīng)用秩和檢驗(yàn)（Wilcoxon符號(hào)秩檢驗(yàn)），多組樣本均數(shù)的差別比較應(yīng)用秩和檢驗(yàn)（Kruskal-Waillis H檢驗(yàn)）。以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1.本實(shí)驗(yàn)測(cè)得原發(fā)性乳腺癌腫瘤組織中CD55hig的細(xì)胞比例均

7、數(shù)為0.21％±0.20。
　　 2.CD55hig的細(xì)胞比例在腋淋巴結(jié)無(wú)轉(zhuǎn)移組、1～3個(gè)腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組及≥4個(gè)腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組之間進(jìn)行兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000）。
　　 3.本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)原發(fā)性乳腺癌腫瘤組織中C-erbB2（-）組的CD55hig的細(xì)胞比例為0.028±0.005，較C-erbB2（+～+++）組的CD55hig的細(xì)胞比例0.277±0.034，有明顯的下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.0

8、00）。
　　 4.乳腺癌不同病理類型之間的CD55hig的細(xì)胞比例無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 5.CD55hig的細(xì)胞比例在乳腺癌患者臨床分期之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 6.CD55hig的細(xì)胞比例在乳腺癌組織中ER（-）、 ER（+～+++）組間，PR（-）、PR（+～+++）組間，Ki67（-）、Ki67（+～+++）組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 7.本研究發(fā)現(xiàn)，CD55hig的細(xì)胞比例在術(shù)前化

9、療組與未化療組的比較中無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)論：
　　 1.本研究發(fā)現(xiàn)乳腺癌腫瘤組織中代表乳腺癌類干細(xì)胞的CD55hig細(xì)胞的均數(shù)比例為0.21％±0.20。
　　 2.原發(fā)性乳腺癌組織中類干細(xì)胞的比例在相對(duì)應(yīng)的腋淋巴結(jié)無(wú)轉(zhuǎn)移組，1～3個(gè)腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組及≥4個(gè)腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組之間進(jìn)行兩兩比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，提示原發(fā)性乳腺癌組織中類干細(xì)胞的比例與乳腺癌患者病灶的轉(zhuǎn)移和病情的進(jìn)展有一定的相關(guān)性。
　　 3.

10、原發(fā)性乳腺癌組織中C-erbB2表達(dá)陽(yáng)性組的乳腺癌類干細(xì)胞比例與C-erbB2（-）組比較有明顯上升，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，提示在侵襲性強(qiáng)的乳腺癌組織中乳腺癌類干細(xì)胞比例增高。
　　 4.本研究未發(fā)現(xiàn)原發(fā)性乳腺癌組織中類干細(xì)胞比例在不同病理類型乳腺癌組織間有明確的相關(guān)性。
　　 5.本研究未發(fā)現(xiàn)原發(fā)性乳腺癌組織中類干細(xì)胞比例與不同臨床分期的乳腺癌病人有明確相關(guān)性。
　　 6.本研究未發(fā)現(xiàn)原發(fā)性乳腺癌組織中類干細(xì)胞比例在乳