乳腺癌組織中浸潤樹突狀細胞的數(shù)量和表面分子表達及其臨床意義.pdf

1、目的：通過對乳腺癌組織及癌旁組織中樹突狀細胞（dendritic cell，DC）的數(shù)量和其表面分子表達情況的分析，探討腫瘤組織中樹突狀細胞的數(shù)量和功能與腫瘤生物的相關(guān)性。腫瘤細胞釋放的免疫抑制因子，主要為IL-10、IL-12、TGF-β1及VEGF等，作用于樹突狀細胞導(dǎo)致其表面分子的表達和功能發(fā)生變化。這些免疫抑制因子單獨或聯(lián)合作用可能造成樹突狀細胞表面分子的低表達或不表達，從而降低樹突狀纓胞的抗原提呈功能，導(dǎo)致腫瘤細胞的免疫逃逸。

2、這對了解腫瘤組織中樹突狀細胞的數(shù)量和功能的改變及保護樹突狀細胞的功能，提高腫瘤免疫治療的效果具有重要意義，同時也為靶向基因治療的臨床應(yīng)用提供了依據(jù)。 方法：病例取材及蘇木精伊紅（HE）染色：原發(fā)性乳腺癌病例，在乳腺癌改良根治術(shù)后組織離體30分鐘內(nèi)進行，每例患者均取腫瘤及癌旁組織，標本迅速置于-80℃冰箱中冷存，后經(jīng)石蠟包埋，切片厚度3微米。蘇木精伊紅染色后封片；免疫組化法檢測乳腺癌及周圍組織中樹突狀細胞的表達：即用型快捷免疫組化

3、Max VisionTM 試劑盒一步法檢測26例乳腺癌及周圍組織中樹突狀細胞的表達，分析樹突狀細胞在乳腺癌及癌旁組織中的表達情況；采用半定量RT-PCR方法從mRNA水平檢測乳腺癌組織及癌旁組織IL-10、TGF-β1、VEGF表達情況：稱取約50毫克乳腺癌組織，用TRIZOL提取乳腺癌組織總RNA，以O(shè)ligo-dt15為引物反轉(zhuǎn)錄生成cDNA，以cDNA產(chǎn)物為模版，使用相應(yīng)引物進行PCR擴增反應(yīng)，擴增產(chǎn)物經(jīng)2%瓊脂糖凝膠電泳檢測。同

4、樣方法檢測癌旁組織中IL-10、TGF-β1、VEGFmRNA水平的表達情況。引物設(shè)計采用Primer5和Oligo引物設(shè)計軟件由大連寶生物工程有限公司合成。 結(jié)果：26例乳腺癌組織中免疫組化染色陽性的樹突狀細胞主要分布于癌周，少量分布于癌灶中，散布于腫瘤細胞間，其突起于腫瘤細胞接觸，并用淋巴細胞相伴浸潤。統(tǒng)計分析結(jié)果表明，乳腺癌樹突狀細胞數(shù)量明顯少于乳腺癌旁組織；26例乳腺癌組織中β-actin有26例表達陽性，陽性率為100

5、%，IL-10有20例表達陽性，陽性率為76．9%，TGF-β1，有20例表達陽性，陽性率為76．9%，VEGF有17例表達陽性，陽性率為65．4%，而癌旁組織中VEGF mRNA僅有3例弱表達，陽性率為11．5%，TGF-β1 mRNA、IL-10 mRNA有7例弱陽性表達，陽性率為26．9%。β-actin有26例表達陽性，陽性率為100%，乳腺癌組織中的IL-10、TGF-β1、VEGFmRNA表達陽性率均盥著高于癌旁組織，差異有

6、統(tǒng)計學(xué)意義（p<0．05）；26例患者中有5例腫瘤組織中有CD1a+、CD83+表達的細胞存在，經(jīng)檢測的0例腫瘤組織中均不表達CD54；DC表面分子表達在乳腺組織中顯著降低。 結(jié)論：乳腺癌組織中浸潤性樹突狀細胞數(shù)量減少，導(dǎo)致機體免疫功能低下，可能成為促進腫瘤的發(fā)生、發(fā)展的原因之一；乳腺癌組織中樹突狀細胞中的CD1a、CD83、CD54表面分子低表達或不表達，，提示腫瘤浸潤性樹突狀細胞是一種功能低下或無功能的DC，無法有效地識別和