大鼠下肢伸直襁褓動(dòng)物模型的建立及該體位對(duì)髖臼發(fā)育影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：發(fā)育性髖關(guān)節(jié)發(fā)育不良(DDH)是小兒外科常見的疾病，嚴(yán)重影響兒童生活質(zhì)量，發(fā)病率約為1.1—3.8‰。目前DDH的真正病因不清楚，認(rèn)為有兩個(gè)主要危險(xiǎn)因素：遺傳因素和機(jī)械因素。本實(shí)驗(yàn)通過建立生后雙下肢伸直襁褓體位動(dòng)物模型及對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大體標(biāo)本與X線的觀察，證實(shí)下肢伸直襁褓體位對(duì)幼鼠髖臼發(fā)育的不良影響；并從分子水平揭示下肢伸直襁褓體位對(duì)幼鼠髖臼軟骨復(fù)合體不同區(qū)域骺板軟骨細(xì)胞增殖、成熟、凋亡的影響，從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面證實(shí)雙下肢伸直襁褓體位是發(fā)

2、育性髖關(guān)節(jié)發(fā)育不良的主要病因之一。 方法：①將60只新生Wistar幼鼠用醫(yī)用膠帶將雙小腿、雙髖關(guān)節(jié)纏繞固定10日，保持髖關(guān)節(jié)伸直內(nèi)收位，模擬雙下肢伸直襁褓體位，作為組一；另將61只新生幼鼠伸髖、屈膝位醫(yī)用膠帶固定雙小腿于雙髖關(guān)節(jié)，制作腘繩肌完全松弛動(dòng)物模型，作為組二；組一、二為實(shí)驗(yàn)組。另60只新生幼鼠雙下肢不予處置，為組三，作為對(duì)照組。②分別于大鼠生后10d末、8w末處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。10d處死之大鼠處死前1h腹腔注射Brdu(1

3、00mg/kg)，觀察髖臼大體變化，制成石蠟切片，部分切片番紅O—快綠染色。8w末處死之大鼠，通過大體標(biāo)本及X線攝片，觀察髖臼變化。③免疫組化顯示髖臼軟骨復(fù)合體軟骨細(xì)胞中VEGF、Ⅹ型膠原及Runx2的改變，觀察雙下肢伸直襁褓體位對(duì)髖臼軟骨復(fù)合體軟骨細(xì)胞成熟變化。④溴2—脫氧尿嘧啶核苷(Brdu)示蹤有絲分裂期軟骨細(xì)胞，觀察雙下肢伸直襁褓體位下骺板軟骨細(xì)胞的增殖；應(yīng)用TUNEL法檢測(cè)雙下肢伸直襁褓體位下骺板軟骨細(xì)胞的凋亡。 結(jié)果

4、：⑴下肢伸直襁褓體位動(dòng)物模型制作成功，實(shí)驗(yàn)組髖臼較對(duì)照組髖臼外形發(fā)生明顯改變，實(shí)驗(yàn)組髖臼指數(shù)及髂骨坐骨夾角明顯增大(p<0.01)，髖關(guān)節(jié)脫位率、DDH發(fā)生率明顯增高(p<0.01)，番紅O—快綠染色可見實(shí)驗(yàn)組髖臼軟骨較對(duì)照組寬(p<0.01)。⑵實(shí)驗(yàn)組VEGF、Ⅹ型膠原與Runx2主要陽性表達(dá)于髖臼軟骨復(fù)合體的髂骨、坐骨、恥骨各支肥大區(qū)，但較對(duì)照組低(p<0.01)。實(shí)驗(yàn)組髖臼關(guān)節(jié)軟骨髂骨支肥大區(qū)VEGF、Ⅹ型膠原與Runx2陽性表達(dá)