流體剪切力對體外培養(yǎng)的鼠破骨細胞形態(tài)和空泡型質(zhì)子泵mRNA的影響.pdf

1、口腔科學(xué)中，缺牙修復(fù)，正畸牙移動，牙周重建及拔牙創(chuàng)的愈合等均涉及到骨代謝。頜骨處在一個不斷動態(tài)改建的過程中，骨重建不但包括成骨細胞的新骨形成，同時還包括破骨細胞的舊骨吸收。當破骨細胞數(shù)量增多、活性增強，將會導(dǎo)致骨吸收增加，往往會出現(xiàn)牙根吸收松動等方面的疾病；反之，破骨細胞數(shù)量減少、活性降低又會導(dǎo)致骨吸收減慢，通常會出現(xiàn)牙萌出障礙等方面的疾病。在骨吸收過程中，破骨細胞被各種刺激因素(主要是應(yīng)力)激活后，胞內(nèi)的空泡型質(zhì)子泵通過轉(zhuǎn)運H<'+>

2、而達到骨基質(zhì)的酸破壞，從而形成骨吸收陷窩。由此可見，破骨細胞空泡型質(zhì)子泵在骨改建過程中具有重要的作用。然而，由于破骨細胞是一種終末分化的細胞，存在培養(yǎng)、檢測、存活時間短、細胞數(shù)量少及無細胞株等局限性，大大限制了破骨細胞的研究。目前尚未檢索到流體剪切力對破骨細胞空泡型質(zhì)子泵mRNA影響的研究報道。 [目的]本研究旨在對鼠破骨細胞的體外培養(yǎng)鑒定和流體剪切力作用下細胞形態(tài)學(xué)及空泡型質(zhì)子泵mRNA的變化作一探討。 [方法]本研究

3、通過動物長骨機械分離法獲得破骨細胞，進行培養(yǎng)鑒定后，對破骨細胞施加剪切應(yīng)力，觀察細胞形態(tài)學(xué)變化，并用實時熒光精確定量聚合酶鏈式反應(yīng)檢測空泡型質(zhì)子泵mRNA的表達水平。 [結(jié)果]①SD一大鼠后肢長骨的機械分離法可獲得足夠的破骨細胞，并能滿足破骨細胞相應(yīng)的形態(tài)學(xué)及功能學(xué)的鑒定標準。②隨著培養(yǎng)時間的延長，破骨細胞數(shù)在達72h后明顯減少。③破骨細胞空泡型質(zhì)子泵ATP6V1a1及TcIRGlmRNA的表達存在時間效應(yīng)，均在培養(yǎng)24h后達到

4、峰值，至72h后，表達量急劇下降。④隨著流體剪切力作用時間的增加和作用強度的增大，SD-大鼠破骨細胞的形態(tài)呈波動性變化，直徑和面積均有增大的趨勢。⑤隨著流體剪切力強度的增大，破骨細胞空泡型質(zhì)子泵ATP6vlal、TcIRGlmRNA的表達水平有增加的趨勢。⑥隨著流體剪切力作用時間的延長，破骨細胞空泡型質(zhì)子泵ATP6vlal、TcIRGl mRNA表達水平有增加趨勢；但隨著流體剪切力作用時間的繼續(xù)延長，破骨細胞ATP6vlal、TcIRG