β-catenin介導(dǎo)的流體剪切力對(duì)成骨細(xì)胞增殖影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、[目的]探討β-連環(huán)蛋白(β-catenin)和細(xì)胞周期素D1(cyclinD1)在流體剪切力(FSS)促進(jìn)小鼠胚胎成骨細(xì)胞系mc3t3-e1細(xì)胞增殖過(guò)程中的作用。
　　 [方法]通過(guò)流體小室系統(tǒng)對(duì)體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞爬片施加不同強(qiáng)度及時(shí)間梯度的流體剪切力，應(yīng)用免疫熒光雙標(biāo)記法檢測(cè)不同大小及時(shí)間梯度流體剪切力作用下體外培養(yǎng)mc3t3-e1細(xì)胞中β-catenin及cyclinD1的表達(dá)；同時(shí)利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)某時(shí)間段處于不同細(xì)胞周

2、期的細(xì)胞百分比，用G2M+S期的百分比作為增殖指數(shù)，表明細(xì)胞的增殖情況和DNA的合成速度，分析β-catenin介導(dǎo)下流體剪切力對(duì)mc3t3-e1細(xì)胞G1→S期轉(zhuǎn)化的影響。
　　 [結(jié)果]中等大小的流體剪切力(12 dyn/cm2)作用下mc3t3-e1細(xì)胞中β-catenin及cyclinD1的表達(dá)較靜置組、低應(yīng)力組(6dyn/cm2)和高應(yīng)力組(18dyn/cm2)明顯增多，增殖指數(shù)也顯著升高(F=5.84，P=0.037)

3、，且β-catenin與cyclinD1的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系。
　　 [結(jié)論]流體剪切力通過(guò)引起β-catenin在胞漿內(nèi)積聚，進(jìn)而核轉(zhuǎn)位發(fā)揮轉(zhuǎn)錄因子的作用，引起目標(biāo)蛋白cyclinD1表達(dá)增加，在G1→S期轉(zhuǎn)化過(guò)程中發(fā)揮了重要作用。成骨細(xì)胞對(duì)低強(qiáng)度的應(yīng)力敏感性較低，較長(zhǎng)時(shí)間才能引起成骨細(xì)胞的活性改變。中等大小的應(yīng)力作用較短時(shí)間可以有效地促進(jìn)細(xì)胞增殖，較高的應(yīng)力則過(guò)早地表現(xiàn)出對(duì)成骨細(xì)胞增殖的抑制。不同應(yīng)力作用下與增殖相關(guān)的分子發(fā)生