菟絲子中黃酮類提取物的神經(jīng)保護(hù)活性研究.pdf

1、菟絲子(CuscutachinensisLam)為旋花科植物，是中國(guó)傳統(tǒng)重要的補(bǔ)益藥之一，具有補(bǔ)陽益陰、固精縮尿、明目止瀉的功效。 選用神經(jīng)細(xì)胞的模式細(xì)胞株P(guān)C12細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，利用H2O2對(duì)細(xì)胞進(jìn)行損傷，造成直接的氧化損傷模型。利用MTT法檢測(cè)菟絲子黃酮類提取物對(duì)損傷細(xì)胞的細(xì)胞活力的影響；采用流式細(xì)胞儀技術(shù)分析DNA的含量、Hoechst33258熒光染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化檢測(cè)菟絲子黃酮類提取物對(duì)細(xì)胞凋亡率的影響；利用DPP

2、H法檢測(cè)不同濃度提取物體外的清除自由基能力。結(jié)果表明，100mg/l和200mg/l的提取物具有明顯的保護(hù)活性，可以顯著提高細(xì)胞存活率，減少凋亡細(xì)胞數(shù)量；菟絲子黃酮類提取物能夠劑量依賴地清除DPPH自由基。初步確立菟絲子黃酮類提取物具有抗氧化活性。 利用魚藤酮誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞凋亡建立帕金森病(PD)體外細(xì)胞模型，考察魚藤酮對(duì)線粒體凋亡通路的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果表明，應(yīng)用魚藤酮24小時(shí)后，細(xì)胞活力下降，凋亡細(xì)胞數(shù)量顯著增加。進(jìn)一步

3、的機(jī)制研究表明，細(xì)胞內(nèi)ROS水平上升，線粒體膜電位下降，谷胱甘肽(GSH)和Bcl-2蛋白水平下降。推斷魚藤酮損傷機(jī)制為細(xì)胞內(nèi)ROS大量產(chǎn)生，谷胱甘肽大量消耗，氧化應(yīng)激加強(qiáng)；同時(shí)線粒體膜電位下降，細(xì)胞啟動(dòng)凋亡程序。 利用魚藤酮模型對(duì)菟絲子黃酮類提取物的神經(jīng)保護(hù)活性進(jìn)行了探討。通過細(xì)胞活力分析、LDH釋放率測(cè)定及AV-PI檢測(cè)凋亡細(xì)胞數(shù)量，發(fā)現(xiàn)菟絲子黃酮類提取物能夠提高魚藤酮損傷細(xì)胞的存活率，減少凋亡，具有明顯的神經(jīng)保護(hù)作用。進(jìn)一