磁性附著體引起小鼠成纖維細(xì)胞L929死亡模式的研究.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文磁性附著體引起小鼠成纖維細(xì)胞L929死亡模式的研究姓名：呂嬌申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：戰(zhàn)德松20050101(：!壅堡董塑苧一j磁性附著體引起小鼠成纖維細(xì)胞L929死亡模式的研究目的本實(shí)驗(yàn)采用直接接觸法，運(yùn)用異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocya—nate，F(xiàn)ITC)標(biāo)記的膜聯(lián)蛋白V(FITC—AnnexinV)結(jié)合碘化丙啶(propidiumiodide，PI)染色雙參數(shù)

2、技術(shù)對(duì)磁性附著體金屬材料261鐵素體不銹鋼引起小鼠成纖維細(xì)胞L929的死亡類型進(jìn)行定量檢測(cè)，并與Tilite含鈦醫(yī)學(xué)合金、CoCr合金相比較，以評(píng)價(jià)材料的生物相容性并分析死亡類型與其細(xì)胞毒性的關(guān)系。材料與方法I實(shí)驗(yàn)材料制備：三組實(shí)驗(yàn)材料(Tilite含鈦醫(yī)學(xué)合金、CoCr合金和261鐵素體不銹鋼)制備成直徑12ram，厚度lmm的圓盤，一面高度拋光。使用前用超聲波振蕩清洗，酒精脫脂，去離子水沖洗并烘干后，高壓蒸汽滅菌。2細(xì)胞培養(yǎng)：取復(fù)蘇

3、后的L929細(xì)胞，放人37℃、95％相對(duì)濕度、5％CO：培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，選取待細(xì)胞達(dá)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后，選取存活率95％的細(xì)胞。3。材料與細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)：將3組無(wú)菌金屬圓盤放入24孔培養(yǎng)板底部，與L929細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)18小時(shí)和24小時(shí)。4AnnexinV—FITC／PI實(shí)驗(yàn)：收集細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度為l106／ml，AnnexinV—FITC／PI染色，流式細(xì)胞儀分析。結(jié)果判定：正?；罴?xì)胞：AnnexinV—Fife(一)／PI(一)；早期凋亡細(xì)