載阿霉素PLGA納米微球的制備及其對肝癌細胞的毒性作用研究.pdf

1、肝癌是常見的病死率較高的惡性腫瘤，全身化療是中晚期癌癥患者的主要治療方法，但全身化療藥物選擇性低，毒副反應(yīng)大，療效差。載藥納米藥物投遞系統(tǒng)是近年來新興的藥物靶向運送制劑，它借助于安全無毒的各種運送載體，采用特殊工藝方法制備納米級別的藥物微球；納米藥物微球具有靶向傳遞、可控緩慢釋放、增強藥效及降低毒副反應(yīng)等特點，有望成為癌癥組織的靶向化療制劑。本課題旨在制備載阿霉素納米微球，研究探討其性質(zhì)表征、制備工藝及體外細胞毒作用，為納米藥物載體制劑

2、的研究及開發(fā)提供一定的實驗基礎(chǔ)。
　　目的
　　制備載阿霉素乳酸羥基乙酸共聚物PLGA納米微球(ADM-PLGA-NP)，分析表征其一般理化性質(zhì)及緩釋特點，探討研究其對體外培養(yǎng)的肝癌細胞系HepG2的細胞毒作用。
　　方法
　　1.采用改良的W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備ADM-PLGA-NP，場發(fā)射掃描電鏡觀察微球形態(tài)，激光衍射粒度分析儀檢測微球粒徑分布及多分散性，紫外分光光度法計算載藥率及包封率，體外藥物釋放實

3、驗考察微球?qū)DM的緩釋規(guī)律；
　　2.HepG2細胞分別與ADM原藥和載藥納米微球ADM-PLGA-NP（根據(jù)體外藥物釋藥曲線計算出釋藥量）共培養(yǎng)一定時間后，相差倒置顯微鏡觀察給藥后的細胞形態(tài)的變化，噻唑藍（MTT）比色法評價ADM-PLGA-NP的細胞毒作用，熒光顯微鏡觀察細胞對ADM-PLGA-NP的吞噬攝取，流式細胞術(shù)半定量細胞內(nèi)的阿霉素藥物含量，研究ADM原藥和載藥納米微球ADM-PLGA-NP的細胞攝取量及細胞毒性差異

4、。
　　結(jié)果
　　1.制備的ADM-PLGA-NP外觀呈圓整球形，無明顯粘連；平均粒徑約237±12.7nm，大小均勻，分布范圍窄，多分散性指數(shù)為0.022；載藥量及包封率分別為1.42±0.67％和23.82±8.34％；藥物在體外緩慢釋放，12h內(nèi)呈突釋，突釋量達藥物總量的55％，5d累積釋放量達85％。
　　2．ADM原藥和載藥納米微球ADM-PLGA-NP分別與HepG2細胞共培養(yǎng)后，相差倒置顯微鏡觀察示細胞貼

5、壁能力減弱，胞質(zhì)固縮，甚至死亡；MTT實驗示空白微球?qū)epG2細胞的平均增殖抑制率為5.98±2.96％；ADM-PLGA-NP和ADM原藥均能抑制HepG2細胞增殖，ADM原藥的細胞抑制增殖率較ADM-PLGA-NP低（p<0.05）；熒光顯微鏡觀察到ADM-PLGA-NP被細胞吞噬后ADM發(fā)出紅色熒光；流式細胞術(shù)半定量顯示，ADM-PLGA-NP較ADM原藥在細胞內(nèi)有更強的ADM藥物分子熒光強度。
　　結(jié)論
　　利用復(fù)