人輸卵管上皮細(xì)胞共培養(yǎng)和表皮生長(zhǎng)因子對(duì)小鼠受精卵體外發(fā)育影響.pdf

1、雖然人體外受精-胚胎移植(IVF-ET)已經(jīng)取得了巨大的發(fā)展，但仍有許多問題尚待解決。其中IVF-ET臨床妊娠率仍較低，其主要原因可能是體外培養(yǎng)缺乏自然受孕的內(nèi)環(huán)境及胚胎發(fā)育所需要的營(yíng)養(yǎng)因子，使其不能滿足胚胎進(jìn)一步發(fā)育的需要，導(dǎo)致大約50％的胚胎在2-4細(xì)胞階段發(fā)生阻滯現(xiàn)象。為模擬體內(nèi)的自然環(huán)境，本研究建立了人輸卵管上皮細(xì)胞共培養(yǎng)體系及在體外培養(yǎng)過程中加入表皮生長(zhǎng)因子(EGF)，以探討人輸卵管上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系及EGF對(duì)受精卵體外發(fā)育的影

2、響。 目的：通過人輸卵管上皮細(xì)胞共培養(yǎng)體系及EGF作用，探討輸卵管上皮及EGF對(duì)受精卵體外發(fā)育的影響。 方法：建立人輸卵管上皮細(xì)胞共培養(yǎng)體系，將小鼠雌雄原核(2PN)受精卵隨機(jī)分為3組，即對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組Ⅰ和實(shí)驗(yàn)組Ⅱ。 對(duì)照組：小鼠受精卵放入DMEM+BSA+青鏈霉素培養(yǎng)液中培養(yǎng) 實(shí)驗(yàn)組Ⅰ：將小鼠受精卵放入人輸卵管上皮原代或一代細(xì)胞+DMEM+BSA+青鏈霉素培養(yǎng)液中培養(yǎng) 實(shí)驗(yàn)組Ⅱ：將小鼠受精卵放入

3、EGF+DMEM+BSA+青鏈霉素培養(yǎng)液中培養(yǎng) 結(jié)果：1、小鼠受精卵在DMEM培養(yǎng)液即對(duì)照組中單獨(dú)培養(yǎng)，發(fā)育至2細(xì)胞、4細(xì)胞、8細(xì)胞及囊胚期的比率分別為：89.3％、48.7％、34.7％和29.3％。 2、小鼠受精卵與人輸卵管上皮細(xì)胞即實(shí)驗(yàn)組Ⅰ共培養(yǎng)，發(fā)育至2細(xì)胞、4細(xì)胞、8細(xì)胞及囊胚期的比率分別為：86.3％、80.6％、75.4％和66.3％。實(shí)驗(yàn)組Ⅰ與對(duì)照組相比，發(fā)育至2細(xì)胞的胚胎數(shù)無(wú)差異，P＞0.05。發(fā)育至4

4、細(xì)胞、8細(xì)胞和囊胚期的胚胎數(shù)有差異，P＜0.05。 3、小鼠受精卵加入EGF即實(shí)驗(yàn)組Ⅱ，發(fā)育至2細(xì)胞、4細(xì)胞、8細(xì)胞及囊胚期的比率分別為：82.6％、76.0％、69.6％和62.5％。實(shí)驗(yàn)組Ⅱ與對(duì)照組相比，發(fā)育至2細(xì)胞的胚胎數(shù)無(wú)差異，P＞0.05。發(fā)育至4細(xì)胞、8細(xì)胞和囊胚期的胚胎數(shù)有差異，P＜0.05。 結(jié)論：1.人輸卵管上皮細(xì)胞共培養(yǎng)體系和EGF對(duì)小鼠早期胚胎克服體外發(fā)育中的阻斷有幫助。 2.人輸卵管上皮細(xì)