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文檔簡介
1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過不同濃度的牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激體外培養(yǎng)的牙髓細(xì)胞,檢測不同時(shí)間下牙髓細(xì)胞中各種礦化相關(guān)因子(DSPP、ALP、BSP)的表達(dá)情況,研究LPS對牙髓細(xì)胞礦化能力的影響。
方法:采用組織塊法獲得大鼠牙髓細(xì)胞,并用免疫組化方法對培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行鑒定,以含0.1 ng/ml、1 ng/ml、10 ng/ml、100
2、 ng/ml和10000 ng/ml牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)LPS作用牙髓細(xì)胞1、3、5d,用熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(實(shí)時(shí)定量PCR)檢測DSPP、ALP、BSP mRNA表達(dá)的變化,采用spss17.0軟件包對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:鏡下貼壁后的細(xì)胞形態(tài)多樣,多呈成纖維樣細(xì)胞形態(tài),還有部分多角形細(xì)胞,胞漿突起。實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示:與對照組相比,1 ng/ml
3、、10 ng/ml LPS組,大鼠牙髓細(xì)胞DSPP、ALP、BSP的mRNA表達(dá)增高,100 ng/ml、10000 ng/ml LPS組,DSPP、ALP、BSP的mRNA表達(dá)均降低;在第1、3、5d時(shí)1ng/ml、10 ng/ml、100ng/ml和10000 ng/ml LPS組mRNA表達(dá)逐漸減少。0.1ng/ml LPS對mRNA的表達(dá)變化無明顯差異。3種因子呈現(xiàn)相似的表達(dá)變化趨勢。
結(jié)論:低劑量Pg LPS有促進(jìn)牙
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