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文檔簡介
1、第一部分哮喘小鼠氣道炎癥及氣道黏液分泌情況
目的:觀察哮喘小鼠氣道炎癥及氣道黏液分泌情況。
方法:清潔級BALB/c小鼠20只隨機(jī)分為2組:哮喘組(AS組)10只,生理鹽水對照組(NS組)10只。哮喘組以卵清白蛋白(OVA)致敏及激發(fā)制作哮喘模型,生理鹽水對照組以生理鹽水代替OVA,余處理同哮喘組。支氣管肺泡灌洗液(BALF)用作細(xì)胞總數(shù)及細(xì)胞分類計數(shù),ELISA檢測支氣管肺泡灌洗液中IL-5及IL-32水平
2、,HE染色觀察小鼠氣道及肺組織病理變化,阿爾辛藍(lán)-過碘酸雪夫染色(AB-PAS)觀察氣道組織杯狀細(xì)胞、黏液分泌情況,免疫組織化學(xué)法(IHC)檢測黏蛋白5AC(MUC5AC)在氣道及肺組織分布情況,實時熒光定量PCR、蛋白免疫印跡法(Western blot)分別檢測MUC5AC mRNA、MUC5AC蛋白在氣道組織表達(dá)。
結(jié)果:AS組小鼠BALF細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞水平均高于NS組(P<0.05)
3、,BALF中IL-5、IL-32水平、氣道組織AB-PAS陽性染色面積、MUC5AC蛋白及mRNA表達(dá)均高于NS組(P<0.05)。
結(jié)論:哮喘小鼠存在氣道炎癥、氣道黏液高分泌。
第二部分:辛伐他汀對哮喘小鼠氣道黏液高分泌的影響
目的:觀察辛伐他汀對哮喘小鼠氣道黏液高分泌的影響,探討辛伐他汀在哮喘小鼠氣道組織MUC5AC表達(dá)中作用機(jī)制。
方法:將清潔級BALB/c小鼠50只隨機(jī)分成
4、5組:生理鹽水對照組(NS組)、哮喘組(AS組)、辛伐他汀干預(yù)組(SIM組)、溶劑對照組(ET組)、地塞米松組(DEX組),每組10只。進(jìn)行。BALF細(xì)胞總數(shù)、白細(xì)胞分類計數(shù),ELISA檢測BALF中IL-5、IL-32水平,HE染色觀察小鼠肺及氣道組織病理變化,AB-PAS染色觀察氣道組織杯狀細(xì)胞、黏液分泌情況,IHC、Western blot、實時熒光定量PCR檢測MUC5AC蛋白及mRNA在氣道及肺組織的表達(dá)。
結(jié)果
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