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文檔簡介
1、目的:
朝醫(yī)麻黃發(fā)表湯對支氣管哮喘小鼠氣道炎癥的影響。
方法:
40只BALB/c雌性小鼠隨機分成5組,即正常對照組、哮喘模型組、朝醫(yī)麻黃發(fā)表湯高劑量組、朝醫(yī)麻黃發(fā)表湯低劑量組、地塞米松陽性對照組。用卵蛋白100μg,氫氧化鋁干粉4mg的混合液,除正常對照組外,其余4組小鼠在第1、7、14天致敏,正常對照組用0.9%氯化鈉腹腔注射。第21天始除正常對照組外的小鼠連續(xù)4天均給予3%OVA霧化吸入激發(fā),正常對照
2、組在相同條件下用0.9%氯化鈉霧化吸入。麻黃發(fā)表湯高、低劑量組和地塞米松陽性對照組在第18天起連續(xù)1周給予灌胃。正常對照組和哮喘模型組均用0.9%氯化鈉灌胃。末次激發(fā)1天后取小鼠肺組織和BALF,肺組織通過HE、PAS染色觀察病理改變,Diff-Quick染色觀察BALF中炎性細胞種類及計數(shù),ELISA法檢測IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ的含量,免疫組化染色法和免疫印記法檢測麻黃發(fā)表湯對哮喘小鼠肺組織NF-κ p65、p-p
3、38MAPK蛋白表達的影響。
結果:
1.通過HE、PAS染色觀察各組小鼠的肺組織,與正常對照組比較,哮喘模型組見肺泡及支氣管壁破壞,管腔分泌物明顯增多,氣道上皮細胞破壞,EOS大量聚集,氣道黏膜見大量的杯狀細胞增生;麻黃發(fā)表湯高、低劑量組與模型組相比較,肺組織損傷程度輕。
2.Diff-Quick染色觀察并統(tǒng)計BALF中炎性細胞種類及計數(shù)結果顯示,哮喘模型組見大量聚集的EOS,細胞總數(shù)和三種細胞計數(shù),包括
4、EOS、NE、淋巴細胞明顯增多,與正常對照組相比有明顯差異(P<0.05);朝醫(yī)麻黃發(fā)表湯高、低劑量組與哮喘模型組相比,少量聚集的EOS及細胞總數(shù)、三種細胞計數(shù)明顯減少(P<0.05)。
3.ELISA法檢測哮喘小鼠模型組BALF中IL-4、IL-5、IL-13含量升高明顯,IFN-γ明顯降低,與正常對照組比較有顯著差異(P<0.05);朝醫(yī)麻黃發(fā)表湯高、低劑量組BALF中IL-4、IL-5、IL-13含量均降低,IFN-γ含
5、量升高,與哮喘模型組相比較,有明顯差異(P<0.05)。
4.免疫組化染色法觀察各組肺組織NF-κBp65表達結果顯示哮喘模型組見細胞核染成深棕黃色,與正常對照組比較,NF-κBp65蛋白表達明顯增多;與哮喘模型組比較,麻黃發(fā)表湯高、低劑量組和地塞米松陽性對照組支氣管周圍見少量染成深棕黃色細胞核,NF-κBp65蛋白表達明顯降低。5.Western blotting檢測p-p38MAPK、NF-κBp65蛋白含量結果顯示哮喘小
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