黃羽肉雞實驗性感染火雞組織滴蟲的研究.pdf

1、火雞組織滴蟲是一種大小不一的多形性原蟲，能夠引起禽類一種常見寄生蟲病:組織滴蟲?。ㄓ址Q傳染性盲腸肝炎或黑頭?。?。該病多發(fā)于火雞和雛雞，珍珠雞、鵪鶉、孔雀中也存在本病的流行，發(fā)病后以盲腸腫脹、腸壁肥厚、內(nèi)有干酪狀的盲腸核心，肝臟出現(xiàn)白色或黃綠色的圓形壞死灶為主要特征。該病往往導(dǎo)致火雞較高的發(fā)病率和死亡率，引起嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，對養(yǎng)雞業(yè)也會造成一定的危害。長期以來，國內(nèi)一直缺乏對該病的系統(tǒng)和詳細(xì)的研究。本研究開展了黃羽肉雞實驗性感染火雞組織滴

2、蟲的研究，初步探討了該病的致病機(jī)理，為進(jìn)一步研制預(yù)防組織滴蟲病的新藥和疫苗奠定了一定的基礎(chǔ)。
　　1.江蘇地區(qū)火雞組織滴蟲β-微管蛋白基因的克隆及系統(tǒng)發(fā)育分析
　　為從分子水平了解火雞組織滴蟲的分類地位與進(jìn)化特征，以江蘇地區(qū)感染火雞組織滴蟲發(fā)病雞群的病變肝臟組織為材料，通過DNA提取、PCR擴(kuò)增、DNA片段的克隆與測序，獲得了該地區(qū)火雞組織滴蟲β-微管蛋白（beta-tubulin）序列，通過軟件與GenBank收錄的其他地

3、區(qū)火雞組織滴蟲和相關(guān)蟲體β-微管蛋白基因序列進(jìn)行了系統(tǒng)發(fā)育分析。結(jié)果表明，所獲得的11個火雞組織滴蟲β-微管蛋白基因序列相互之間同源性在95.3％～100.0％之間，親緣關(guān)系較近，與德國株相似性94.9％以上，與美國株相似性91.6％以上。同時，該地區(qū)蟲體在基因進(jìn)化過程中形成2個大的分枝和多個小的分枝。研究結(jié)果進(jìn)一步明確了江蘇地區(qū)的火雞組織滴蟲存在不同的基因型，需要進(jìn)一步系統(tǒng)研究其分子流行病學(xué)與種群遺傳學(xué)特征。
　　2.兩株火雞組

4、織滴蟲分離株對黃羽肉雞致病力的比較
　　應(yīng)用本實驗室分離培養(yǎng)的兩株火雞組織滴蟲單克隆蟲株JSYZ-A株和JSYZ-B株，對15日齡的蘇禽黃羽肉雞進(jìn)行泄殖腔感染，比較了其致病力的差異。蘇禽黃羽肉雞隨機(jī)分成三組，一組為陰性對照組，另外兩組分別感染兩株火雞組織滴蟲單克隆蟲株，感染劑量為105個蟲體/羽。感染后第15天對雞進(jìn)行撲殺稱重，并對各組雞的發(fā)病率、死亡率、增重、肝臟和盲腸病變計分進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，比較兩株單克隆蟲株的致病力。實驗結(jié)果

5、表明，不同地區(qū)分離得到的火雞組織滴蟲單克隆蟲株致病力存在一定差異，單克隆培養(yǎng)的火雞組織滴蟲JSYZ-A株的致病力較JSYZ-B株強(qiáng)。
　　3.黃羽肉雞火雞組織滴蟲感染后體內(nèi)蟲體的動態(tài)分布
　　為了研究火雞組織滴蟲感染黃羽肉雞后在其內(nèi)的動態(tài)分布，將JSYZ-A株蟲體通過泄殖腔感染15日齡蘇禽黃羽肉雞，在感染后7天至31天內(nèi)，每3天撲殺5只感染雞，采集12個不同組織臟器的樣品，并對樣品進(jìn)行PCR檢測和病理學(xué)分析。結(jié)果表明，在感染

6、后7天起，在部分黃羽肉雞的盲腸和肝臟中檢測到蟲體，蟲體維持時間最長。在心臟、十二指腸、空腸、脾臟、肺臟、法氏囊、腺胃、直腸中，偶爾能夠檢測到蟲體。在胰臟、腦組織中并未檢測到蟲體。肝臟和盲腸病變程度在10-16天時最高，19天后病變程度減輕。PCR的結(jié)果與病理學(xué)實驗檢測的結(jié)果基本一致。研究結(jié)果顯示火雞組織滴蟲主要靶器官為肝臟和盲腸，但其并非單一感染盲腸和肝臟，而是會侵染機(jī)體的各個組織，其感染的具體路徑還有待于進(jìn)一步研究。
　　4.黃

7、羽肉雞火雞組織滴蟲感染后生理及生化指標(biāo)動態(tài)變化
　　為了進(jìn)一步探究火雞組織滴蟲致病機(jī)理，通過應(yīng)用本實驗室分離培養(yǎng)的JSYZ-A株蟲體通過泄殖腔感染15日齡蘇禽黃羽肉雞，并設(shè)空白對照組。在感染后7天至31天內(nèi)，每3天撲殺5只感染雞和對照雞，采取非抗凝血進(jìn)行生化指標(biāo)檢測，同時進(jìn)行體重稱重。研究發(fā)現(xiàn)，火雞組織滴蟲的感染會導(dǎo)致感染雞體重減輕。導(dǎo)致機(jī)體的一系列生化指標(biāo)出現(xiàn)紊亂，如:谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶、球蛋白、尿素濃度上升