門靜脈阻斷下自制在體冷灌注液對(duì)肝臟保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、一、目的: 利用人工血管行腸系膜上靜脈與肝下下腔靜脈搭橋建立暫時(shí)性腸腔分流動(dòng)物模型，初步摸索腸腔分流條件下豬單純門靜脈阻斷的安全時(shí)限，進(jìn)而，在這個(gè)模型的基礎(chǔ)上，在安全時(shí)限極限點(diǎn)對(duì)比觀察不灌注、經(jīng)門靜脈在體灌注林格氏液體和自制灌注液對(duì)長時(shí)間門靜脈阻斷下的肝臟的影響，以期證實(shí)經(jīng)門靜脈在體灌注自制灌注液對(duì)肝臟的保護(hù)作用。 二、方法: 先將14頭正常巴馬小型豬分為A組(門靜脈阻斷120min)、B組(門靜脈阻斷150mi

2、n)，兩組均用人造血管在腸系膜上靜脈、肝下下腔靜脈間架橋，行腸腔分流。對(duì)照觀察兩組動(dòng)物術(shù)后存活情況，檢測在阻斷前、復(fù)流前、復(fù)流2h及術(shù)后1d，3d，5d的各時(shí)相點(diǎn)ALT、AST、TBIL，光鏡下肝組織病理變化情況，電鏡下觀察肝臟超微病理改變。初步判定暫時(shí)性腸腔分流條件下門靜脈阻斷安全時(shí)限后，另取14頭巴馬小型豬分為C、D兩組，同前兩組建立腸腔分流模型，按安全時(shí)限上限阻斷門靜脈，阻斷后行經(jīng)門靜脈在體冷灌注，C組灌注乳酸林格氏液、D組灌注自

3、制灌注液，監(jiān)測各組動(dòng)物術(shù)中HR、MAP，對(duì)比觀察A、C、D三組動(dòng)物在阻斷前、復(fù)流前、復(fù)流2h、術(shù)后1d，3d，5d的ALT、AST、TBIL的變化，對(duì)應(yīng)時(shí)相點(diǎn)切取肝組織行光鏡、電鏡觀察肝臟病理變化。 三、結(jié)果: 1、整個(gè)阻斷門靜脈的過程中，各組動(dòng)物腸管未見明顯淤血，顏色基本正常，證實(shí)采用人工血管在腸系膜上靜脈與肝下下腔靜脈間架橋行暫時(shí)性門腔分流有效。 2、A組動(dòng)物全部長期存活率為100％，B組長期存活率為57.1

4、％，兩組動(dòng)物存活率有顯著差異。 3、在復(fù)流前、復(fù)流2h、術(shù)后ld各相同時(shí)象點(diǎn)，B組動(dòng)物的ALT、AST、TBIL組較A組明顯升高，兩組有顯著性差異(P<0.05)。 4、A組門靜脈阻斷120 min，匯管區(qū)炎細(xì)胞浸潤：復(fù)流2h后，病變進(jìn)一步加重，肝細(xì)胞出現(xiàn)變性，灶性壞死，肝竇充血，匯管區(qū)及肝竇內(nèi)明顯炎細(xì)胞浸潤。B組門靜脈阻斷150 min肝見匯管區(qū)大量出血，白細(xì)胞聚集，細(xì)胞廣泛空泡樣變，肝組織灶性壞死：復(fù)流2h后，進(jìn)一步

5、加重，肝細(xì)胞廣泛氣球樣變、脂肪變性，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、水腫明顯，肝竇廣泛充血，匯管區(qū)及肝竇大量炎性細(xì)胞浸潤，B組較A組損傷更為顯著，兩組有顯著性差異。電鏡下B組較A組線粒體水腫，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張擴(kuò)張更為明顯，且出現(xiàn)細(xì)胞核高度濃縮，纖維沉積等不可逆損傷。 5、A、C、D三組動(dòng)物長期存活率均為100％，三組無差異。 6、A、C、D肝功比較：ALT在復(fù)流2h，術(shù)后1d、術(shù)后3d，A、C、D組之間兩兩具有明顯差異(P<0.05)，A組水平

6、明顯高于D組，C組居于A、D組之間。AST在復(fù)流2h時(shí)分別為： A組1229±275.1 IU/L C組917±289，5 IU/L，D組459.8±279.6 IU/L，具有明顯差異(P<0.05)。A、C兩組之間在復(fù)流2h、術(shù)后1dAST水平無顯著差異(P>0.05)。C、D兩組比較在AST升高高峰期即復(fù)流2h、術(shù)后1d兩時(shí)相點(diǎn)具有顯著差異(P<0.05)，D組(自制灌注液保護(hù)組)明顯低于C組(林格氏液組)。A組與D組比較

7、，在復(fù)流前、術(shù)后3天TBIL有明顯差異(P<0.05)，自制灌注液組明顯低于不行灌注的A組。 7、根據(jù)病理學(xué)評(píng)分、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明：D組(自制灌注液組)動(dòng)物肝組織匯管區(qū)炎細(xì)胞浸潤較A組及復(fù)流2小時(shí)時(shí)明顯減少，肝血竇增寬，與阻斷前肝組織病變無明顯差異((P>0.05)。在術(shù)后5d，C、D兩組動(dòng)物肝臟病理改變基本恢復(fù)于阻斷前水平，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，未見明顯細(xì)胞水腫，氣球樣變，與阻斷前無明顯差異(P>0.05)。而A組動(dòng)物匯管區(qū)仍可見炎細(xì)

8、胞，部分肝細(xì)胞輕度水腫。術(shù)后三組動(dòng)物的病理改變A組動(dòng)物恢復(fù)最慢，D組恢復(fù)情況明顯好于A、C兩組。 8、電鏡下肝臟超微病理改變D組(自制保護(hù)液灌注組)較A、C組變化要輕，輕度的線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，細(xì)胞核形態(tài)基本正常。C組介于A、D兩組之間。 四、結(jié)論: 1、采用人工血管行腸系膜上靜脈與下腔靜脈搭橋建立臨時(shí)性腸腔分流，在此條件下行單純門靜脈長阻斷，這一實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型是一個(gè)研究腸腔分流條件下門靜脈阻斷的安全時(shí)限的較為理想