小檗堿對(duì)大鼠肝臟冷缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:肝臟缺血再灌注損傷的發(fā)生是一個(gè)復(fù)雜、多因素的過程，其中包含炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激以及細(xì)胞凋亡等會(huì)對(duì)肝臟細(xì)胞造成極大損害的過程。小檗堿是一種臨床常用的抗炎癥反應(yīng)的藥物，近年來研究表明小檗堿還具有抗氧化應(yīng)激和抑制細(xì)胞凋亡的作用。本實(shí)驗(yàn)旨在研究小檗堿對(duì)大鼠肝臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其相關(guān)機(jī)制。
　　方法:健康雄性SD大鼠24只，周齡8～10周，體重200～250 g，采用隨機(jī)數(shù)字表法分成3組:假手術(shù)組（A組），對(duì)照組（B組）和小檗

2、堿組（C組），每組8只。A組僅進(jìn)行開關(guān)腹操作。B、C組采用改良的胡建平等方法行在體原位冷缺血再灌注。本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭袑⒑ㄆ降确椒ㄖ性械牧魅氲榔㈧o脈改為門靜脈，將原有的流出道右腎上腺靜脈改為肝下下腔靜脈。增大了流出道口徑，避免肝臟灌注時(shí)水腫的發(fā)生。C組于手術(shù)前14 d給予小檗堿灌胃。B組于術(shù)前14 d給予等量生理鹽水灌胃。于術(shù)后6h取大鼠血液標(biāo)本測(cè)定大鼠血清ALT和AST濃度，應(yīng)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫(ELISA)法測(cè)IL-1β，IL-6評(píng)

3、估肝臟炎癥反應(yīng)情況;取肝組織，觀察肝臟組織形態(tài)學(xué)變化;ELISA法測(cè)定組織MDA和SOD含量，評(píng)價(jià)肝臟組織氧化應(yīng)激損傷情況;檢測(cè)肝臟組織caspase-3的活性;TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的情況。數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示。組間比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:A組大鼠血清ALT、AST、IL-1β、IL-6和MDA含量均比B、C組低(P＜0

4、.01)，A組肝臟組織SOD含量高于B、C兩組(P＜0.01)。C組與B組相比大鼠血清ALT、AST、IL-1β和IL-6濃度含量均降低(P＜0.05)。與B組相比較，C組肝組織MDA含量降低（P＜0.05）而肝組織SOD含量升高（P＜0.05）。C組凋亡水平及capase-3的表達(dá)均低于B組(P＜0.05)。組織病理中A組為正常肝臟組織結(jié)構(gòu)，B、C組肝臟組織出現(xiàn)程度不同的損傷。B組肝組織損傷明顯，C組肝組織損傷較B組輕。
　　結(jié)

5、論:1、本研究采用的大鼠肝臟冷缺血再灌注模型包含冷灌注、再復(fù)流過程，能模擬肝移植供肝灌注、再植過程。術(shù)后6h，轉(zhuǎn)氨酶升高，肝臟存在組織病理學(xué)損傷，提示建模成功;2、小檗堿對(duì)大鼠肝臟冷缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用，表現(xiàn)為轉(zhuǎn)氨酶ALT、AST水平降低;細(xì)胞因子IL-1β和IL-6水平降低;MDA水平降低，SOD水平升高;凋亡細(xì)胞數(shù)減少;caspase-3的活性降低。其機(jī)制可能與小檗堿抑制冷保存肝臟炎癥反應(yīng)的發(fā)生和氧化應(yīng)激反應(yīng)，減輕冷保存肝臟細(xì)