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文檔簡介
1、目的:建立體外缺氧/復(fù)氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)損傷模型,通過觀察全氟化碳(perfluocarbon,PFC)對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)缺氧/復(fù)氧損傷的保護(hù)作用及其調(diào)控機(jī)理,深入理解和闡釋PFC的生物學(xué)效應(yīng)及作用機(jī)制,為其在心肌缺血再灌注損傷中的臨床應(yīng)用提供更為客觀和充分的理論依據(jù)。
方法:采用化學(xué)方法(連二亞
2、硫酸鈉溶液法)制備缺氧/復(fù)氧(H/R)損傷模型。實(shí)驗(yàn)分組為:對照組、10%PFC組、H/R組、PFC+H/R處理組(5%、10%、20%)(以上均為培養(yǎng)液體積比)。 CCK-8法測定細(xì)胞活力;比色法依次檢測細(xì)胞培養(yǎng)基中乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenase,LDH)外漏量,胞內(nèi)丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、一氧化氮(Nitric oxide,NO)的含量及超氧化物歧化酶(Superoxide dism
3、utase,SOD)的活性;蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot,WB)分析細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3的表達(dá)。
結(jié)果:與對照組相比,10%PFC組中各待檢指標(biāo)差異均不明顯(P>0.05)。相比與模型組,10%、20%PFC處理組能提高細(xì)胞活力A、降低胞內(nèi)NO含量及減少Caspase-3的表達(dá)(P<0.05);5%、10%、20%PFC處理組能顯著降低LDH外漏量、胞內(nèi)MDA含量及提高SOD的活性(P<0.01)。
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