急性髓系白血病細(xì)胞VCAM-1、CD34、CD117的表達(dá)研究.pdf

1、急性白血病(atue leukemia AL)是一組異質(zhì)性惡性克隆性疾病，系造血干細(xì)胞或祖細(xì)胞突變引起的造血系統(tǒng)惡性腫瘤，發(fā)病時(shí)大量的白血病細(xì)胞在骨髓中增殖，抑制正常造血，并廣泛浸潤(rùn)其他器官和組織。研究發(fā)現(xiàn)在白血病細(xì)胞不斷增殖、浸潤(rùn)的過(guò)程中，粘附分子(adhesion molecules)發(fā)揮了重要作用，而血管細(xì)胞粘附分子(vascular cell adhesion molecule1，VCAM-1)作為其中的一員，可介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞、

2、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間的粘附，并可選擇性的促進(jìn)單個(gè)核細(xì)胞的粘附。以往研究表明：VCAM-1主要來(lái)源于非造血細(xì)胞，如骨髓基質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、組織巨噬細(xì)胞及樹(shù)突狀細(xì)胞，最后研究發(fā)現(xiàn)在急性白血病初診患者血液中VCAM-1的水平異常升高，推測(cè)這種高水平的VCAM-1可能與白血病細(xì)胞自身表達(dá)的VLA4相結(jié)合，通過(guò)激活PI3K依賴的信號(hào)途徑，在白血病的增殖、分化、遷移、浸潤(rùn)中發(fā)揮重要作用，有研究證實(shí)，白血病細(xì)胞存在自分泌功能，可以分泌一些細(xì)胞因子及粘

3、附因子促進(jìn)自身的增值和浸潤(rùn)。國(guó)外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)在某些類型的急性髓系白血病細(xì)胞可以表達(dá)VCAM-1，引起人們的關(guān)注。 CD34是一種分子量為105～120 KD的糖蛋白，是干細(xì)胞、祖細(xì)胞的標(biāo)志，它是一種階段特異性抗原。最近有研究發(fā)現(xiàn)，白血病細(xì)胞同樣具有CD34抗原的表達(dá)，且在M0、M1、M2等分化程度較差的白血病類型當(dāng)中CD34多有高表達(dá)，臨床常出現(xiàn)髓外浸潤(rùn)表現(xiàn)，而且CD34+過(guò)度表達(dá)也可能是不良預(yù)后因素之一。 CD11

4、7是c—kit受體(c—kit receptor，c—kit R)膜外區(qū)分子表面抗原標(biāo)志，其配體為干細(xì)胞因子(SCF)，SCF是重要的造血生長(zhǎng)因子，同其他細(xì)胞因子協(xié)同作用可刺激造血干/祖細(xì)胞的增殖和分化。研究表明CD117主要表達(dá)在髓系幼稚細(xì)胞上，正常的骨髓造血干細(xì)胞、定向祖細(xì)胞上CD117表達(dá)率僅為4％。但在急性髓系白血病細(xì)胞上存在CD117高表達(dá)，多出現(xiàn)在M0、M1分化程度較低的急性髓系白血病類型，并且也易出現(xiàn)髓外浸潤(rùn)表現(xiàn)，似與CD

5、34有良好的相關(guān)性。在CD34與CD117表達(dá)的急性髓系白血病細(xì)胞上，VCAM-1表達(dá)如何，是否具有相關(guān)性，目前尚不明確，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞VCAM-1、CD34及CD117的表達(dá)研究，探討其白血病細(xì)胞自身VCAM-1、CD34、CD117的表達(dá)情況以及VCAM-1、CD34、CD117_者之間的相關(guān)性，進(jìn)一步了解VCAM-1的來(lái)源，并試圖為急性髓系白血病的預(yù)后判斷提供新的檢測(cè)指標(biāo)。 材料和方法： 1、材料

6、 1.1標(biāo)本的來(lái)源：16例白血病骨髓標(biāo)本均來(lái)自我院血液科住院期間的急性髓系白血病患者(經(jīng)患者同意后)。 1.2采集時(shí)間：2008.4到2009.3。 1.3采集時(shí)期：16例骨髓標(biāo)本采集于初診時(shí)，2骨髓標(biāo)本例采集于急性髓系白血病復(fù)發(fā)時(shí)。 1.4符合條件：以上患者診斷均符合2007.8張之南、沈悌主編的第三版《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》關(guān)于急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn)及復(fù)發(fā)、難治的診斷標(biāo)準(zhǔn)。 2、實(shí)驗(yàn)步驟和方法

7、 取符合條件的患者骨髓液2ml(肝素鈉抗凝20IU/ml)，并分別在PE標(biāo)記的VCAM-1、CD34、CD117熒光單抗20ul中加入骨髓單個(gè)核細(xì)胞106個(gè)，室溫避光15分鐘。然后溶血法去除標(biāo)本中的紅細(xì)胞，離心、去上清。加入固定液500ul后上機(jī)檢測(cè)。 3、統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS13軟件分析白血病細(xì)胞自身VCAM-1、CD34、CD117的表達(dá)，結(jié)果用Means±Std表示，均數(shù)的組間比較采用秩和檢驗(yàn)或T檢驗(yàn)(根據(jù)數(shù)

8、據(jù)是否符合正態(tài)分布決定)，組間相關(guān)分析采用秩和檢驗(yàn)Spearman等級(jí)相關(guān)或Pearson相關(guān)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1.急性髓系白血病細(xì)胞VCAM-1表達(dá)呈低水平，與對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(Z=-1.843 P=0.06)。 2.急性髓系白血病細(xì)胞CD34、CD117表達(dá)呈高水平，與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(tCD34=4.09 pCD34=0.01；tCD117＝3.82 pCD117＝

9、0.045)。 3.急性髓系白血病難治組與非難治組比較，CD34表達(dá)升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(ZCD34=—2.475 pCD34=0.01)；CD117表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(tCD117＝1.95 pCD117=0.73)。 4.急性髓系白血病細(xì)胞VCAM-1的表達(dá)同自身CD117表達(dá)水平成正相關(guān)(r=0.51P=0.04)。 5.急性髓系白血病細(xì)胞VCAM-1表達(dá)與自身CD34表達(dá)無(wú)相關(guān)性(r=0.15 P=0.58)

10、。 6.急性髓系白血病白細(xì)胞CD34與CD117表達(dá)成正相關(guān)(r=0.511 p=0.02)。 結(jié)論： 1.急性髓系白血病細(xì)胞VCAM-1表達(dá)呈低水平，同對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 2.急性髓系白血病細(xì)胞CD34與CD117表達(dá)呈高水平，同對(duì)照組比較有顯著性差異。 3.急性髓系白血病細(xì)胞CD34表達(dá)增高可能預(yù)示疾病難治。 4.急性髓系白血病細(xì)胞CD34與CD117表達(dá)成正相關(guān)。 5.