GLP-1通過(guò)WNT通路改善肝臟胰島素抵抗機(jī)制探討.pdf

1、目的：研究GLP-1對(duì)糖尿病小鼠的作用及其改善肝臟胰島素抵抗可能的分子生物學(xué)機(jī)制。
　　方法：將db/db小鼠分為兩組，一組為生理鹽水組（對(duì)照），一組為利拉魯肽組，同時(shí)在相同的飼養(yǎng)環(huán)境下飼養(yǎng)。兩組動(dòng)物每天分別腹腔注射生理鹽水與利拉魯肽，干預(yù)8周，檢測(cè)小鼠的體重，血糖，胰島素和HOMA-IR。取肝臟石蠟包埋固定，H-E染色觀察。提取動(dòng)物肝臟的蛋白和RNA，用Western Blots和real-time PCR方法檢測(cè)糖異生酶與WN

2、T通路相關(guān)蛋白與RNA的表達(dá)情況。與此同時(shí)在體外用FFA干預(yù)HepG2細(xì)胞，建立胰島素抵抗模型。利用siRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)使β-catenin沉默，不同利拉魯肽濃度10-8mol/L，10-7mol/L干預(yù)細(xì)胞，Western Blots檢測(cè)p-FoxO1，PEPCK，G6Pase和WNT信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。GOD-POD法檢測(cè)培養(yǎng)基中葡萄糖剩余量。結(jié)果：與對(duì)照組相比，利拉魯肽組干預(yù)四周開(kāi)始，體重顯著減輕，血糖下降，胰島素水平減低，

3、HOMA-IR值降低，且作用一直持續(xù)到實(shí)驗(yàn)結(jié)束。利拉魯肽治療后肝臟結(jié)構(gòu)改善，脂滴減少。利拉魯肽組肝臟內(nèi)的G6Pase與PEPCK的表達(dá)減少，而β-catenin的表達(dá)則明顯增加。體外實(shí)驗(yàn)中，高脂干預(yù)成功建立細(xì)胞胰島素抵抗模型，該模型細(xì)胞糖異生增加，葡萄糖攝取率降低。當(dāng)利拉魯肽濃度為10-7mol/L時(shí)糖異生減弱最明顯，葡萄糖攝取增加。而阻斷β-catenin后，利拉魯肽干預(yù)并未使糖異生減少，葡萄糖攝取增加。
　　結(jié)論：利拉魯肽可降