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1、Necdin是MAGE(melanoma-associated antigen)家族Ⅱ類重要成員之一，主要表達(dá)在神經(jīng)發(fā)育過程中所有分裂的神經(jīng)元及分化后的神經(jīng)元中。目前研究已發(fā)現(xiàn)Necdin在神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)揮重要的生理功能:Necdin能夠結(jié)合E2F1轉(zhuǎn)錄活性域，抑制細(xì)胞生長;與p53作用等調(diào)控凋亡;與p75 NTR作用，參與NGF誘導(dǎo)的p75信號通路，促進(jìn)神經(jīng)元分化;與PWS發(fā)生密切相關(guān)[1-5]等。隨著研究進(jìn)展，Necdin的重要性得到
2、越來越多的關(guān)注。而過表達(dá)外源Necdin對P19細(xì)胞的細(xì)胞周期和增殖是否有影響，目前還沒有相關(guān)報(bào)道。本課題將在實(shí)驗(yàn)室前期良好的研究基礎(chǔ)上探討過表達(dá)外源Necdin對P19細(xì)胞的細(xì)胞周期和增殖的影響。
實(shí)驗(yàn)中通過構(gòu)建真核表達(dá)載體及制備穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞克隆并對穩(wěn)定轉(zhuǎn)染pCMV-tag2B-Necdin及PcDNA3.1-Necdin后穩(wěn)定過表達(dá)外源Necdin的P19細(xì)胞克隆用WestemBlot方法驗(yàn)證Necdin表達(dá)量，用流式細(xì)胞
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