雪靈芝皂甙的提取純化及抗氧化活性研究.pdf

1、雪靈芝（Areneria Kensuensis Marim var ova Tipetala Tsui，A．K）又名草靈芝，為高原野生植物，學(xué)名卵瓣蚤綴，屬石竹科蚤綴屬，為多年生墊狀草本植物。本文以雪靈芝全草為原料，研究了雪靈芝中皂甙化合物的提取與純化工藝。運(yùn)用化學(xué)分析、色譜、光譜及質(zhì)譜等儀器和分析方法，對(duì)雪靈芝中皂甙化合物的含量測(cè)定、結(jié)構(gòu)推析及生物活性進(jìn)行了初步研究。主要研究結(jié)果如下：
　　 1雪靈芝皂甙定量分析方法的確立

2、r>　　 采用國(guó)標(biāo)中相關(guān)方法對(duì)雪靈芝全草的主要成分進(jìn)行分析，其中水分含量為8.61％，灰分3.93％，粗蛋白7.06％，粗脂肪1.93％，總糖10.79％，還原糖7.28％。定性分析結(jié)果表明雪靈芝中含有三萜類皂甙。選用紫外-可見分光光度法測(cè)定雪靈芝皂甙含量。對(duì)照品選用人參皂甙Rb1（Ginselloside Rb1，GRb1），以5％香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸作為顯色體系，經(jīng)紫外掃描確定550 nm為最大吸收波長(zhǎng)。所得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：

3、Y=4.395X-0.0012，相關(guān)系數(shù)R2=0.9993，平均加標(biāo)回收率為102.71％（RSD=1.032％）；試驗(yàn)從穩(wěn)定性、精密度和重現(xiàn)性幾方面對(duì)測(cè)定方法的可靠性進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果表明該測(cè)定方法穩(wěn)定可靠，重現(xiàn)性好，且操作簡(jiǎn)便快捷。
　　 2雪靈芝皂甙提取工藝條件的優(yōu)化
　　 通過考察了提取液濃度、時(shí)間、溫度和料液比四個(gè)單因素對(duì)雪靈芝總皂甙提取得率的影響，結(jié)合四元二次回歸通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)，確定出提取的最佳工藝條件是：提取

4、時(shí)間4.78～5.22 h、提取溫度77.9～82.8℃、乙醇濃度68.5～73.3％、固液比1：38.4～1：42.9。在此條件下，雪靈芝總皂甙提取得率可達(dá)1.47％。
　　 3雪靈芝皂甙純化方法的研究及其結(jié)構(gòu)初探
　　 研究大孔吸附樹脂對(duì)雪靈芝皂甙分離純化的影響，通過對(duì)7種大孔吸附樹脂對(duì)雪靈芝總皂甙靜態(tài)吸附和解吸附能力的比較，并對(duì)AB-8型大孔樹脂的動(dòng)態(tài)吸附特性進(jìn)行了研究。最佳純化工藝參數(shù)為：上樣液濃度4.32 mg

5、/mL，pH6.0，上樣流速2 BV/h，洗脫劑為60％乙醇溶液，2 BV/h流速進(jìn)行洗脫，所得產(chǎn)品含量可達(dá)79.47％。采用薄層色譜、紅外、電噴霧質(zhì)譜等分析手段，對(duì)雪靈芝皂甙化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析，推測(cè)該化合物可能為三糖型原人參二醇皂甙的同分異構(gòu)體。
　　 4雪靈芝皂甙抗氧化活性研究
　　 采用化學(xué)發(fā)光法考察雪靈芝皂甙TS和TS2的抗氧化活性及對(duì)DNA損傷的保護(hù)作用，結(jié)果表明雪靈芝皂甙TS和TS2都具有清除超氧陰離子、羥基