核桃外果皮多酚提取純化及抗氧化活性研究.pdf

1、以核桃外果皮為研究對象,對核桃外果皮多酚提取與純化工藝、抑菌及抗氧化活性進行了研究。分別采用超聲波輔助提取法和酶提取法提取核桃外果皮多酚,研究了核桃外果皮顆粒度、提取次數(shù)、料液比、提取時間、提取溫度、纖維素酶及果膠酶液濃度、酶液pH值等因素對核桃外果皮多酚得率的影響;通過9種大孔吸附樹脂對核桃外果皮多酚提取液的靜態(tài)吸附和解吸附試驗,篩選出純化核桃外果皮多酚的最優(yōu)樹脂,對該樹脂的上樣濃度、提取液pH值、上樣量、上樣流速、洗脫劑濃度、洗脫劑

2、用量、洗脫流速等因素進行研究,考察該樹脂對核桃外果皮多酚的吸附和解吸效果;采用濾紙片法,研究核桃外果皮多酚對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、斯坦利沙門氏菌、酵母菌的抑菌效果;以Vc為對照,通過核桃外果皮多酚對DPPH·自由基、超氧陰離子自由基和羥自由基的清除能力以及還原能力的測定,研究其體外抗氧化效果;采用昆明種小鼠進行動物體內(nèi)抗氧化試驗,通過低、中、高三個劑量組核桃外果皮多酚純化物對小鼠進行灌胃,對小鼠血清、肝臟組織中蛋白質(zhì)含

3、量、GSH-PX、SOD活性、MDA的含量測定,研究核桃外果皮多酚體內(nèi)抗氧化能力。結(jié)果表明:四種提取核桃外果皮多酚的最優(yōu)工藝條件為:超聲波輔助提取法:提取溫度50℃,提取時間30min,乙醇溶液濃度40％,料液比1:20,核桃外果皮總多酚得率為0.70%;果膠酶法提取:酶解時間120min,加酶量0.5%(果膠酶質(zhì)量/核桃外果皮粉質(zhì)量),pH值5.0,酶解溫度40℃,料水比1:20,多酚得率為0.63%;纖維素酶法提取:加酶量1.28%

4、,酶解溫度40.29℃,酶解時間115.20min,多酚得率為0.73%;纖維素酶和果膠酶復合酶法提取:果膠酶:纖維素酶(v/v)=1:3(酶溶液濃度0.02g/mL),酶解溫度50℃,酶解時間90min,pH值4.0,料水比1:20,多酚得率為0.75%;復合酶法提取的多酚得率最高,其次為纖維素酶法提取,再次為超聲波輔助提取,果膠酶法提取的多酚得率最低。復合酶法提取的多酚得率比超聲波輔助提取僅多0.05%,而且耗時較長,成本較高,綜合

5、考慮選擇超聲波輔助提取法提取核桃外果皮多酚。篩選出最優(yōu)大孔吸附樹脂為HZ-801,最優(yōu)純化工藝為:上樣流速2BV/h,上樣體積6BV,上樣液濃度6.68μg/mL,解吸液乙醇溶液濃度70%,洗脫劑流速2BV/h,洗脫劑體積為70mL在此條件下,提取液多酚含量由純化前的8%提高到17.68%。在10-100μg/mL濃度范圍內(nèi),核桃外果皮多酚對DPPH·的清除能力強于Vc;核桃外果皮多酚濃度為100μg/mL時對超氧陰離子自由基的清除率最