桔梗多酚的提取、純化及抗氧化活性研究.pdf

1、桔梗，是桔梗科(Campanuaceae)桔梗屬(Platycodon)多年生草本植物，是我國(guó)藥食同源的植物之一。桔梗富含皂苷、多酚、黃酮、多糖、萜類(lèi)、甾體等成分，并含十余種氨基酸及鎂、鐵、鋅等多種微量元素，食用部分主要為地下莖，性平，味苦、辛，歸肺經(jīng)，具有止咳、化痰、排膿等的作用?，F(xiàn)代藥理研究顯示，桔梗具有保肝、抗氧化、抗炎、抗腫瘤、降血糖、降血脂、調(diào)節(jié)免疫等功效。
　　(1)通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定了桔梗中含有皂苷類(lèi)、糖及苷類(lèi)、多酚類(lèi)、

2、黃酮類(lèi)、甾體及萜類(lèi)、油脂類(lèi)和有機(jī)酸等多種活性成分。通過(guò)比較乙醇回流提取法、超聲波輔助乙醇提取和超聲波輔助乙醇回流提取法，確定采用超聲波輔助乙醇回流提取法作為桔梗多酚的提取方法。通過(guò)單因素試驗(yàn)及響應(yīng)面優(yōu)化法優(yōu)化得到乙醇提取桔梗多酚的最佳工藝條件為超聲時(shí)間32min，乙醇體積分?jǐn)?shù)62％，液料比21∶1(mL/g)，提取溫度62℃，超聲功率為450W，浸提時(shí)間為1.5h，此條件下提取所得桔梗多酚的最大得率為1.647mg/g。
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3、)將桔梗多酚粗提液經(jīng)過(guò)石油醚、乙酸乙酯萃取，再采用大孔吸附樹(shù)脂對(duì)桔梗多酚進(jìn)行了純化。經(jīng)比較，選擇AB-8作為純化用的樹(shù)脂。最佳純化條件為:pH值5.84，上樣流速為1.0mL/min，吸附時(shí)間為1.0h;采用60％乙醇作為洗脫劑，用2BV的洗脫劑洗脫，洗脫時(shí)流速為0.6mL/min。在此條件下，純化前桔梗多酚平均值由45.402mg/g可增加到94.013mg/g，總抗氧化能力平均值可由純化前的60.167 U/mL提高到122.047

4、U/mL。
　　(3)通過(guò)葡聚糖LH-20凝膠對(duì)桔梗多酚進(jìn)行分離，得到2個(gè)組分。利用紫外、紅外光譜分析，結(jié)果桔梗多酚在280nm處有最大的吸收峰，各功能團(tuán)引起的振動(dòng)特征吸收峰均符合多酚類(lèi)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。通過(guò)HPLC測(cè)定，進(jìn)一步驗(yàn)證出桔梗多酚樣品中存在兒茶素和對(duì)羥基肉桂酸兩種多酚類(lèi)化合物。運(yùn)用外標(biāo)法計(jì)算出桔梗多酚中兒茶素為8.226μg/mL，對(duì)羥基肉桂酸為6.050μg/mL，分別占桔梗多酚總量的41.13％和30.25％。
　

5、　(4)采用同濃度的精制桔梗多酚和抗壞血酸，通過(guò)T-AOC試劑盒比較了兩者的總抗氧化能力，精制桔梗多酚的總抗氧化能力不如抗壞血酸。通過(guò)清除O2-·自由基、·OH自由基、DPPH自由基能力來(lái)研究桔梗多酚的體外抗氧化能力，結(jié)果表明自由基的清除率與樣品濃度呈正相關(guān)。比較三種自由基的50％清除率的濃度(SC50)可知，·OH自由基清除率達(dá)50％時(shí)所需的桔梗多酚濃度最小，僅為0.11mg/mL。而O2-·自由基和DPPH自由基的SC50分別為0.