小腦頂核調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞功能的作用途徑研究.pdf

1、目的：實驗室以前的研究說明小腦頂核參與調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞功能，但其調(diào)節(jié)途徑尚不十分清楚。為此，本研究一方面進一步揭示小腦頂核對淋巴細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用，另一方面探索其作用途徑，從而拓寬對小腦功能的認(rèn)識和增加神經(jīng)—內(nèi)分泌—免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的知識。 方法：在大鼠小腦雙側(cè)頂核內(nèi)微量注射O．1％海人酸(KA)各0．4μl以毀損頂核內(nèi)神經(jīng)元的胞體，并以雙側(cè)頂核內(nèi)注射等量生理鹽水作為對照。術(shù)后8天用血細(xì)胞計數(shù)法檢測動物外周血中的淋巴細(xì)胞數(shù)；用酶聯(lián)免疫吸

2、附試驗(ELISA)檢測動物血清中抗綿羊紅細(xì)胞(SRBC)特異性IgM抗體的水平。在另外大鼠的一側(cè)小腦頂核內(nèi)注射神經(jīng)束路追蹤劑—1O％生物素化葡聚糖胺(BDA)O．1μl，術(shù)后8天動物灌注固定后取腦，從小腦至下丘腦作冠狀面冰凍連續(xù)切片，腦切片用二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，或作Nissl染色，以順行追蹤小腦項核神經(jīng)元軸突投射至下丘腦的路徑和終止部位。取另外大鼠，在其小腦上腳交叉處用電毀損法局限性毀損小腦頂核神經(jīng)元投射至下丘腦的神經(jīng)纖維，以

3、同樣手術(shù)但假損毀小腦上腳交叉的動物作為對照，兩組動物都同時進行小腦頂核BDA順行神經(jīng)束路追蹤以觀察毀損效果。術(shù)后8天用血細(xì)胞計數(shù)法檢測動物外周血中的淋巴細(xì)胞數(shù)；用ELISA法檢測動物血清中抗SRBC特異性IgM抗體的水平。 結(jié)果：小腦項核注射KA后的第8天，其Nissl染色切片上可見頂核內(nèi)神經(jīng)元無Nissl小體，說明頂核內(nèi)的神經(jīng)元胞體被有效損毀；而在頂核外側(cè)的兩個核團(間位核和齒狀核)內(nèi)的神經(jīng)元胞體正常無損；在KA注射入頂核的部

4、位有大量胞體較小的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的增生。作為對照，在小腦頂核注射生理鹽水后第8天的Nissl染色切片上，可見頂核及其它兩個核團內(nèi)的Nissl小體正常存在。在小腦雙側(cè)頂核的神經(jīng)元胞體被有效損毀后的第8天，動物外周血中的淋巴細(xì)胞百分比及抗SRBC的特異性IgM抗體水平均明顯高于頂核注射生理鹽水的對照動物。在小腦頂核注射BDA后第8天的順行神經(jīng)束路示蹤所見，頂核神經(jīng)元胞體發(fā)出的神經(jīng)纖維經(jīng)小腦上腳交叉后到達對側(cè)的下丘腦外側(cè)區(qū)、后區(qū)及室旁核等區(qū)域和

5、核團，尤以下丘腦外側(cè)區(qū)為主。電毀損小腦上腳交叉內(nèi)的頂核至下丘腦的神經(jīng)纖維后的第8天所見，頂核神經(jīng)元軸突投射至下丘腦的神經(jīng)纖維基本被中斷，下丘腦中無明顯的BDA陽性神經(jīng)纖維。與此同時，動物外周血中的淋巴細(xì)胞百分比及抗SRBC的特異性tgM抗體水平均明顯高于假毀損小腦上腳交叉的動物，此結(jié)果與KA損毀小腦頂核后的結(jié)果一致。 結(jié)論：KA毀損雙側(cè)小腦頂核內(nèi)的神經(jīng)元胞體后導(dǎo)致淋巴細(xì)胞功能增強，提示小腦項核參與了免疫功能的調(diào)節(jié)；電毀損小腦上腳