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文檔簡介
1、本論文以綿羊外周血淋巴細胞為研究對象,采用體外培養(yǎng)方法探討了沙蔥多糖對綿羊細胞免疫調(diào)節(jié)作用及其相關機理。試驗研究內(nèi)容與結(jié)果如下:
1.體外無菌分離與培養(yǎng)綿羊外周血淋巴細胞,在倒置相差顯微鏡下觀察淋巴細胞形態(tài)。觀察結(jié)果表明淋巴細胞胞體呈圓形,胞體小,大小均勻,在培養(yǎng)液中能夠懸浮生長。
2.設置不同濃度(0-250μg/mL)的沙蔥多糖和不同的作用時間(24h、48h、72h),以MTT比色法檢測淋巴細胞增殖,試驗結(jié)果表
2、明沙蔥多糖在體外能促進綿羊外周血淋巴細胞增殖,并有劑量依賴及時效關系。作用持續(xù)24h、濃度為250μg/mL時對淋巴細胞增殖效果最強。
3.以流式細胞術觀察沙蔥多糖對綿羊外周血T淋巴細胞亞群的變化,結(jié)果表明沙蔥多糖在體外能使綿羊外周血CD4+細胞數(shù)量及CD4+/CD8+比值升高,降低其CD8+細胞數(shù)量。
4.采用放射免疫法檢測沙蔥多糖在不同濃度(0-250μg/mL)、不同作用時間(12h、24h、48h、72h)對
3、綿羊外周血淋巴細胞培養(yǎng)上清中IL-6的影響,試驗結(jié)果表明沙蔥多糖在體外能夠促進綿羊外周血淋巴細胞培養(yǎng)上清中IL-6的分泌。當作用持續(xù)24h時對ConA誘導的淋巴細胞培養(yǎng)上清中IL-6分泌水平最高。
5.采用實時熒光定量 PCR法測定沙蔥多糖對綿羊外周血淋巴細胞 IL-6mRNA表達量的影響,其結(jié)果表明在體外沙蔥多糖各濃度組在作用持續(xù)12h、24h、48h、72h時均促進綿羊外周血淋巴細胞IL-6mRNA表達量。當濃度為50μg
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