口服與經(jīng)皮膚途徑的ERT對手術(shù)絕經(jīng)婦女T淋巴細(xì)胞功能的影響.pdf

1、近年的不少研究提示雌激素在機(jī)體免疫功能和免疫介導(dǎo)性疾病中起重要作用，其機(jī)制可能和雌激素受體有關(guān)。婦女絕經(jīng)后體內(nèi)女性激素急劇下降，其免疫功能也發(fā)生了很大變化。隨著雌激素替代治療(estrogen replacement therapy，ERT)的廣泛應(yīng)用，其對絕經(jīng)后婦女免疫功能的影響也受到人們的關(guān)注。但關(guān)于ERT對絕經(jīng)婦女免疫平衡影響的研究還很少，且ERT對絕經(jīng)婦女免疫細(xì)胞上雌激素受體(estrogen receptor，ER)亞型表達(dá)的

2、影響也尚未見報道。 第一部分：不同濃度雌二醇對去勢小鼠脾細(xì)胞雌激素受體表達(dá)及Th1/Th2平衡的影響。 目的： 研究不同濃度雌二醇(estradiol，E<,2>)對去勢小鼠脾細(xì)胞雌激素受體亞型及輔助性T細(xì)胞1(T-helper 1,Th1)和輔助性T細(xì)胞2 (T-helper 2，Th2)之間平衡的影響。 方法: 將10周齡雌性BALB/C小鼠脾細(xì)胞分為7組：青年組、假手術(shù)組、去勢對照組，以及去

3、勢+E<,2>(10<'-11>mol/L、10<'-10>mol/L、10<'-9>mol/L、10<'-9>mol/L)各四組，培養(yǎng)72小時。收集脾細(xì)胞，提取脾細(xì)胞總RNA，逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscription polymerase chain reaction，RT-PCR) 方法檢測 ER α、ER β mRNA表達(dá)。收集培養(yǎng)上清液，酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent

4、 aSS8lv，ELISA) 檢測細(xì)胞因子干擾素-γ(IFN-γ)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)和白細(xì)胞介素-4 (IL-4) 水平，以了解Th1/Th2平衡的關(guān)系。 結(jié)論: 1、不同濃度E<,2>對去勢小鼠脾細(xì)胞上ERα、ERβ表達(dá)起不同調(diào)節(jié)作用。我們的結(jié)果支持雌激素在生理范圍內(nèi)對ER為正向調(diào)節(jié)，超生理范圍為負(fù)向調(diào)節(jié)這一觀點。 2、小鼠去勢影響脾細(xì)胞Th1/Th2平衡的變化，出現(xiàn)Th1漂移現(xiàn)象。而生理濃度的E<,

5、2>能改善Th1漂移，部分恢復(fù)Th1/Th2的平衡。 3、雌激素通過和ERα、ERβ結(jié)合影響小鼠脾細(xì)胞的Th1/Th2平衡。 第二部分：口服與經(jīng)皮膚途徑的ERT對手術(shù)絕經(jīng)婦女T淋巴細(xì)胞功能的影響。 目的: 研究口服與經(jīng)皮膚途徑的雌激素替代治療對手術(shù)絕經(jīng)婦女T淋巴細(xì)胞雌激素受體亞型表達(dá)的影響及對T淋巴細(xì)胞功能的影響。 方法: 將手術(shù)絕經(jīng)0.5～1.5年以內(nèi)的婦女分為兩組，分別為口服組和皮貼組

6、，每組12人，分別使用雌二醇片(1mg/天)和半水合雌二醇貼片(1.5mg/周)，用藥3個月。用藥前后采用“改良Kupperman評分法”、“絕經(jīng)期生存質(zhì)量量表”評估圍絕經(jīng)癥狀和生存質(zhì)量的情況；全自動微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)(ACCESS)檢測靜脈血中E<,2>和FSH水平；流式細(xì)胞儀(FCM)測定外周血T淋巴細(xì)胞亞群；ELISA法檢測T淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子IFN-γ、IL-2和IL-4水平，以了解Th1/Th2之間平衡的關(guān)系；實時熒

7、光定量RT-PCR技術(shù)檢測T淋巴細(xì)胞上ERα、ERβ mRNA的表達(dá)；免疫印跡法(Western-blot)和免疫熒光法(immunofluorescence)檢測T淋巴細(xì)胞上ERα、ERβ蛋白質(zhì)表達(dá)。 結(jié)論: 1、口服組和皮貼組治療后E<,2>水平較用藥前明顯升高，F(xiàn)SH水平較用藥前明顯降低，其圍絕經(jīng)癥狀和生存質(zhì)量均得到明顯改善和提高。 2、口服組和皮貼組治療后外周血CD3<'+>細(xì)胞均較用藥前明顯增加，且CD

8、4<'+>/CD8<'+>細(xì)胞比值均較用藥前明顯上升。 3、口服組和皮貼組用ERT后IL-2、IFN-γ均分泌下降，且IL-4分泌增加，改善了Th1/Th2平衡。 4、口服組和皮貼組用ERT后T淋巴細(xì)胞上ERα表達(dá)均明顯增加，且血清E<,2>升高和ER表達(dá)的增加是一致的。 5、口服和經(jīng)皮膚途徑的ERT均能改善手術(shù)絕經(jīng)婦女的T淋巴細(xì)胞功能，且雌激素主要通過T淋巴細(xì)胞上的ER(主要為ERα)發(fā)揮作用。 6、絕