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1、目的:研究維藥異常黑膽質(zhì)成熟劑總酚對(duì)體外宮頸癌SiHa細(xì)胞株增殖的作用及作用機(jī)理,從而理論上提出異常黑膽質(zhì)成熟劑總酚用于宮頸癌患者治療的可行性。
方法:1)用不同濃度的異常黒膽質(zhì)成熟劑總酚作用于人宮頸癌SiHa細(xì)胞,于作用后24h,48h,72h,96h,用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,MTT比色法測(cè)定各組細(xì)胞的抑制率和半數(shù)抑制濃度(IC50);2)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同濃度的異常黑膽質(zhì)成熟劑總酚作用于人宮頸癌SiHa細(xì)胞后4
2、8h的細(xì)胞凋亡率的變化,以及Bcl-2和端粒酶的表達(dá)情況;3)用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法檢測(cè)不同濃度的異常黑膽質(zhì)成熟劑總酚作用于人宮頸癌SiHa細(xì)胞48小時(shí)后FHIT及Survivin基因的表達(dá)情況。
結(jié)果:1)在75~175μg/ml濃度區(qū)間,異常黑膽質(zhì)成熟劑總酚對(duì)SiHa細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用,并且隨著藥物濃度的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞的抑制率升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);2)SiHa細(xì)胞經(jīng)異常黒膽
3、質(zhì)成熟劑總酚作用后均出現(xiàn)明顯的凋亡特征,且隨著藥物濃度增高,作用時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化更明顯;3)流式細(xì)胞儀分析結(jié)果顯示隨著異常黑膽質(zhì)成熟劑總酚濃度的增加,SiHa細(xì)胞的凋亡率升高,Bcl-2及端粒酶的表達(dá)降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);4)實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR結(jié)果顯示異常黑膽質(zhì)成熟劑總酚后,SiHa細(xì)胞中FHIT表達(dá)增強(qiáng),Survivin表達(dá)減弱(P<0.05)。
結(jié)論:1)異常黒膽質(zhì)成熟劑總酚能抑制宮頸
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