鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞中FOLR1相互作用蛋白的驗(yàn)證.pdf

1、目的:本研究目的是利用已建立的鼻咽癌的親本細(xì)胞系及紫杉醇耐藥細(xì)胞系，對(duì)課題組前期研究篩選出的信號(hào)分子(Lyn、UBC、Ncaph2、IRAK3、Cul3)與FOLR1的相互作用進(jìn)行驗(yàn)證，并初步探討目的蛋白與FOLR1可能的相互作用通路。
　　方法:以免疫共沉淀及Western Blot方法驗(yàn)證體外培養(yǎng)的正常鼻咽上皮細(xì)胞NP69、三株鼻咽癌親本細(xì)胞（CNE-1、HNE-2、5-8F）及紫杉醇耐藥細(xì)胞（CNE-1/Taxol、HNE-

2、2/Taxol、5-8F/Taxol）中FOLR1與Lyn、UBC9、Ncaph2、IRAK3及Cul3是否存在相互作用。
　　結(jié)果:1.以FOLR1抗體對(duì)鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞系CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol以及5-8F/Taxol細(xì)胞總蛋白進(jìn)行免疫共沉淀后，復(fù)合物中可以檢測(cè)到Cul3、IRAK3以及Ncaph2的表達(dá)，但是無(wú)Lyn以及UBC9的表達(dá)，而陰性對(duì)照中5個(gè)抗體均無(wú)表達(dá)。2.以Cul3、IRAK3、Nca

3、ph2、Lyn以及UBC9抗體對(duì)鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞系CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol以及5-8F/Taxol細(xì)胞總蛋白進(jìn)行免疫共沉淀后，Cul3、IRAK3以及Ncaph2沉淀的復(fù)合物中可以檢測(cè)到FOLR1的表達(dá)，而Lyn及UBC9的復(fù)合物中未檢測(cè)到FOLR1的表達(dá)，陰性對(duì)照NP69沉淀物中亦未檢測(cè)到FOLR1的表達(dá)。
　　結(jié)論:1.蛋白FOLR1與Cul3、IRAK3及Ncaph2在人鼻咽癌親本細(xì)胞和鼻咽癌紫杉醇