多西紫杉醇對(duì)人鼻咽癌細(xì)胞系CNE-Ⅰ的放射增敏作用.pdf

1、中 文 摘 要雋 一一盲 一 一一 一最近人們發(fā)現(xiàn)某些抗腫瘤藥物除了 具有細(xì)胞毒性作用外， 可能還有放射增敏作用。由 于 抗腫瘤藥物作為放射增敏劑在臨 床應(yīng)用時(shí)， 有其它藥物不可比 擬的 優(yōu)越性， 因 此受到腫瘤放射治療界的廣泛重 視。目 前 作用于 微管的 紫杉類新型 抗腫瘤藥物較多， 其中 對(duì)泰素放射增敏作用的 研究r多 ， 而且各家的 報(bào)道差異很大， 有關(guān)多西紫杉醇放射增敏作用的 研究報(bào)道較少見。 本實(shí)驗(yàn)采用細(xì)胞集落 形成方法來(lái)研

2、究多西紫杉醇對(duì)鼻咽癌細(xì) 胞系C N E - I 有無(wú)放射增 敏作用及其放射增敏作用與其作用時(shí)間和濃度的相關(guān)性， 從而為今后臨床使用多西紫杉醇作為放射增敏劑提供理論依據(jù)。 一 F ? P - 驗(yàn) 材 料I 、 細(xì)胞系: 人鼻咽癌細(xì)胞系 C N E - I ， 由中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒研究所提供。2 、 藥 物: 多西紫杉醇( T A X O T E R E ) ， 由A V E N T I S 公司 饋贈(zèng)，冷藏保存。實(shí)驗(yàn)前將藥物用 P

3、R M 1 1 6 4 0 培養(yǎng)液配制成所需的濃度。3 、 主要試劑: P R M 1 1 6 4 0 培養(yǎng)液， 內(nèi) 含 1 0 %新生小牛血清。 胰酶， P B S 液。4 、 主 要儀器: 二氧化碳培養(yǎng)箱、 倒置顯微鏡、 微量加 樣器和血球 計(jì)數(shù)器由中國(guó) 醫(yī) 科大學(xué)細(xì) 胞生物實(shí)驗(yàn)室提供。 P R I M U S 直線加 速 器由 中國(guó) 醫(yī) 科大學(xué)放療科提供。 6 c m塑料平皿， 由 華美生物制品有限 公司提供。( 2 ) 不同 濃

4、度多西紫杉醇作用 相同時(shí)間對(duì) C N E - I 細(xì)胞放射敏感性的 影響以 高 于I D 5 0 的1 x 1 0 一 ‘ m g / m l ( I D 9 0 ) , 2 x 1 0 一 ， m g / m l ( I D 7 0 ) 和 低 于I D 5 0 的1 、 1 0 - 8 m g / m l ( I D 3 5 ) 的 藥 物濃 度 作 放射增敏 研 究。 將 培養(yǎng) 瓶?jī)?nèi) 指數(shù)生長(zhǎng) 期的C N

5、E - I 細(xì)胞 胰酶 消 化， 計(jì)數(shù)活細(xì) 胞數(shù)， 逐 級(jí)稀釋后將細(xì)胞接種6 c m平皿中， 貼壁培養(yǎng) 1 2 小時(shí)。吸出 培 養(yǎng) 液， 用 藥 組 分別加人含有不同 濃 度多西紫 杉醇( I x 1 0 - 6 m g / m l , 2 x 1 0 - ' m g / m l , I x 1 0 - ' m g / m l ) 的 培 養(yǎng) 液5 m 1 ， 單 純照 射 組只 加 人 不含藥物培養(yǎng)液

6、5 m 1 ， 繼續(xù)培養(yǎng)3 小時(shí)后立即除去藥物， 并用P B S 液洗滌細(xì)胞兩次， 加人不含藥物培養(yǎng)液5 m l 。然后單純照射 組和 藥 物 加照射組用劑量率2 0 0 c G y / m i n , S S D I 0 0 c m 6 M V X 線分別照 射1 , 3 , 5 , 7 , 9 G y 。 照射后在3 7 } C , 5 % C 0 2 培養(yǎng)箱內(nèi) 繼續(xù)培養(yǎng)1 4天。( 3 ) 同 一濃度多西紫杉醇作用

7、不同時(shí)間對(duì) C N E - I 細(xì)胞放射敏感性的影響以2 x 1 0 - ' m 酬 m l 多西紫杉醇 進(jìn) 行實(shí) 驗(yàn)。 用藥組加人 含有2 x 1 0 一 ， m g / m l 多 西紫 杉 醇 培 養(yǎng)液 分 別 繼 續(xù)培 養(yǎng)3 , 6 , 2 4 小時(shí)， 余處理方法同上。培養(yǎng) 1 4 天后， 細(xì)胞用9 5 %乙醇固定后， 0 . 2 5 %結(jié)晶紫染色， 并計(jì) 數(shù) 集落 數(shù)( 計(jì)數(shù)含有婆5 0 個(gè)細(xì)胞的 集落) ， 計(jì)

8、算細(xì)胞存活率( S F ) 。 存活 率二 照射后細(xì)胞形成的 集落數(shù) / ( 接種細(xì)胞數(shù)x 未照射細(xì)胞集落形成數(shù)) 。采 用S P S S 8 . 0 和O r i g i n 統(tǒng)計(jì)軟 件 根據(jù)各照 射劑量 點(diǎn)的 存活 率繪制細(xì) 胞 存活曲 線， · 由 細(xì) 胞存活曲 線計(jì)算出 多西紫杉醇在1 0 %存 活 率 水 平時(shí)的 放射增敏比( S E R ) 。S E R的定義為在達(dá)到相同 生物效應(yīng)時(shí) 單純照射組的 劑量與藥物加照射