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文檔簡介
1、目的:
1、在體外觀察多西他賽對人食管癌細胞系EC-9706生長抑制的影響,初步探索多西他賽對細胞周期分布的影響及其作用機制。2、在體外觀察多西他賽及X線聯(lián)合作用對人食管癌細胞系EC-9706生長抑制的影響,探討多西他賽的放射增敏作用及機制,為食管癌的放射增敏治療提供新的思路和方法。3、通過RT-PCR檢測照射后食管癌細胞系EC-9706Bcl-2基因的表達情況,探討X線對細胞的生長抑制和誘導(dǎo)凋亡的機制。
方
2、法:
1、用不同濃度的多西他賽處理食管癌細胞系EC-9706,以集落形成實驗檢測多西他賽對該細胞株的生長抑制作用。2、以0、0.25×10-9、0.5×10-9、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L的多西他賽處理細胞24h、48h、72h后以流式細胞儀法檢測細胞周期分布。3、以10-6mol/L的多西他賽處理細胞24h,再以6MV-X線0、2Gy照射細胞,分別于照射后24h和48h以流式細胞儀法檢測細胞細胞周期
3、的分布。4、以6MV-X線0Gy、4Gy、6Gy作用于細胞,于1h、6h和24h分別提取細胞總RNA,以RT-PCR法檢測細胞Bcl-2基因的表達。
結(jié)果:
1、多西他賽在體外能抑制EC-9706細胞的增殖,并呈濃度依賴性。多西他賽可以誘導(dǎo)EC-9706細胞凋亡和G2/M期阻滯。2、多西他賽可以使細胞周期阻滯在G2/M期,并呈現(xiàn)出時間-濃度依賴性。3、2GyX線照射可以解除由于多西他賽處理而引起的G2/M期細
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