雌、孕激素對絨癌細胞系Galectin-3的調節(jié)作用.pdf

1、目的：通過體外試驗研究不同濃度雌、孕激素對BeWo絨癌細胞系中Galectin-3的表達，探討17-β雌二醇(17-βE2)、甲羥孕酮(MPA)對滋養(yǎng)細胞侵襲性Galectin-3基因表達的影響作用。 材料與方法： 1.細胞培養(yǎng)及激素處理 人絨毛膜癌細胞株BeWo常規(guī)培養(yǎng)于含10％的小牛血清F12培養(yǎng)液中，在37℃、5％CO2條件下培養(yǎng)。細胞在生長對數(shù)期時轉入用活性炭處理的F12培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時后，用不同濃度

2、的17-β雌二醇(17-βE2)、甲羥孕酮(MPA)分別處理人絨毛膜癌細胞株BeWo24小時，收集細胞。 2.方法 1)免疫熒光對Galectin-3在人絨毛膜癌細胞株BeWo的定位和半定量檢測。 2)Westernblot分析處理的BeWo細胞株上的Galectin-3蛋白含量。 3)RT-PCR測定不同處理的BeWo細胞株上的Galectin-3mRNA含量。 結果： 1.免疫熒光分析

3、顯示Galectin-3在人絨毛膜癌細胞株BeWo有表達，蛋白主要定位于細胞漿中，細胞核有少量表達。10-8mol/L濃度雌激素處理的和10-7、10-6mol/L濃度孕激素處理的BeWo細胞顯色明顯高于對照組(P＜0.05)，10-5mol/L孕激素使Galectin-3表達降低(P＜0.05)，其余處理組無明顯差異。 2.Westernblot結果同上 3.RT-PCR結果顯示10-8mol/L濃度雌激素處理的和10

4、-7、10-6mol/L濃度孕激素處理的BeWo細胞Galectin-3mRNA含量均高于對照組(P＜0.05)，10-5mol/L孕激素使Galectin-3表達降低(P＜0.05)，其余處理組無明顯差異。 結論： 1.Galectin-3基因是一種多功能基因，存在于人絨毛膜癌細胞株BeWo上，說明該基因參與滋養(yǎng)細胞侵襲能力的調控。 2.10倍于生理濃度(10-8mol/L)的雌激素可以上調滋養(yǎng)細胞中Galec

5、tin-3蛋白的表達，表明在類似于妊娠早期的雌激素時，通過增加該基因的表達調節(jié)滋養(yǎng)細胞的侵襲能力。 3.生理濃度和10倍于生理濃度(10-6mol/L)的孕激素可以增加滋養(yǎng)細胞中Galectin-3蛋白的表達，而100倍于生理濃度(10-5mol/L)的孕激素使滋養(yǎng)細胞中Galectin-3蛋白的表達降低，說明不同濃度的孕激素可對滋養(yǎng)細胞侵襲力發(fā)揮不同作用。 4.Galectin-3基因的表達在不同濃度雌，孕激素作用下呈