己烯雌酚和雙酚A對(duì)人類胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成的影響.pdf

1、目的:孕酮和雌激素對(duì)妊娠的維持至關(guān)重要。在人類胎盤中，孕酮和雌激素的產(chǎn)生主要由3β-羥基類固醇脫氫酶1(3β-hydroxysteroid dehydrogenase1，HSD3B1)和芳香酶(cytochrome aromatase，CYP19A1)催化而來。孕烯醇酮(pregnenolone，PREG)在HSD3B1的催化下，形成孕酮(progesterone，P4)。雄激素在芳香酶CYP19A1及輔助因子NADPH共同作用下催化為

2、雌激素。而這兩個(gè)酶的活性會(huì)受到環(huán)境雌激素的影響。本研究中，我們將對(duì)兩個(gè)環(huán)境雌激素己烯雌酚(diethylstilbestrol，DES)和雙酚A(bisphenol A，BPA)對(duì)人類胎盤中HSD3B1和CYP19A1酶活性的影響進(jìn)行探究。
　　方法:HSD3B1蛋白由人HSD3B1基因轉(zhuǎn)錄而來，通過對(duì)COS1細(xì)胞中HSD3B1的測(cè)定從而確定HSD3B1活性的抑制程度。通過對(duì)JEG-3微粒體蛋白中CYP19A1的測(cè)定，從而確定CY

3、P19A1活性的抑制程度。
　　結(jié)果:當(dāng)己烯雌酚和雙酚A加入JEG-3細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí)，己烯雌酚能夠高度抑制孕酮的產(chǎn)生，雙酚A能夠中度的抑制孕酮的產(chǎn)生。己烯雌酚和雙酚A都能中度抑制脫氫表雄酮介導(dǎo)的雌二醇的產(chǎn)生。己烯雌酚對(duì)HSD3B1的半數(shù)抑制濃度(IC50)為1.17±0.095μM。當(dāng)加入底物孕烯醇酮后，己烯雌酚作為競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。當(dāng)加入輔助因子NAD+，己烯雌酚作為混合型抑制劑。己烯雌酚和雙酚A能中度抑制人胎盤CYP19A1，I