術(shù)后早期草酸鉑腹腔化療對大鼠結(jié)腸吻合口愈合影響及GM-CSF干預(yù)效應(yīng)的實驗研究.pdf

1、中晚期胃腸癌根治術(shù)后發(fā)生腹膜種植轉(zhuǎn)移率約為4％～19％，常給予全身化療，患者中位生存期為5.2～12.6個月。國外學(xué)者對根治性手術(shù)聯(lián)合術(shù)中經(jīng)腹膜腔化療，包括術(shù)后早期腹腔化療(early postoperative intraperitoneal chemotherapy，EPIC)進(jìn)行了Ⅱ期、Ⅲ期的臨床研究，結(jié)果顯示局部復(fù)發(fā)率降低，患者生存期延長。但是必須權(quán)衡由于早期腹腔化療延緩了胃腸吻合口的愈合，所帶來的術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生的風(fēng)險。至今，化

2、療藥物是否損害消化道吻合口的愈合尚存爭議，多數(shù)的研究認(rèn)為術(shù)后早期腹腔化療對腸吻合口的愈合有著不利的影響<'[1～6]>。 目的：通過術(shù)后早期腹腔注射草酸鉑(oxaliplatin，L-OHP)研究對大鼠結(jié)腸吻合口愈合的影響及粒．巨噬細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte macrophage-colony stimulatingfactor，GM-CSF)的干預(yù)效應(yīng)，以期為臨床中消化道腫瘤術(shù)后早期應(yīng)用草酸鉑腹腔化療提供理論依據(jù)

3、。 方法：健康Wistar大鼠60只，隨機(jī)分為3組：Control組(A組)、L-OHP組(B組)和L-OHP+GM-CSF組(C組)，每組20只。每組內(nèi)再隨機(jī)分為2個亞組，即：術(shù)后7天，14天。經(jīng)腹正中切口行結(jié)腸離斷術(shù)，結(jié)腸斷端行端端吻合術(shù)，A組術(shù)后24h腹腔注射生理鹽水20ml/kg；B組術(shù)后24h腹腔注射草酸鉑20mg/kg；C組結(jié)腸吻合完成后，在吻合口兩側(cè)漿膜下層用21G注射器注射GM-CSF 50gg，術(shù)后24h腹腔注

4、射草酸鉑同B組。比較3組動物的一般情況，腸吻合口的并發(fā)癥，吻合口組織的羥脯氨酸含量、破裂壓以及Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維含量。3組大鼠術(shù)后7d，14d，采用按原手術(shù)入路開腹，確定吻合口位置，大體觀察有無吻合口并發(fā)癥發(fā)生；參考Van Der Ham測定法，測吻合口破裂壓，記錄壓力曲線突然降低時的數(shù)值為腸吻合口破裂壓值。以吻合口為中心切取長約6cm的結(jié)腸，等分為兩部分，一部分固定于4％多聚甲醛，常規(guī)石蠟包埋切片，分別行HE染色和免疫組織化學(xué)染色，光鏡

5、下觀察吻合口愈合情況及測定Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維含量，由圖像分析儀進(jìn)行分析，結(jié)果取像素(pixels,p)和面積(μm<'2>)平均值的乘積；另一部分組織于-80℃深低溫冰箱保存，按堿水解法測定吻合口組織中羥脯氨酸含量。所得數(shù)據(jù)采用SAS v6.12統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果： 1 一般情況：術(shù)后各組大鼠無一例死亡，Control組大鼠術(shù)后6h恢復(fù)活動力，接受腹腔化療的實驗動物，均較Control組大鼠活動力下降，表現(xiàn)為倦

6、怠，對外界刺激反應(yīng)遲鈍，10％(2/20)動物大便呈稀水樣改變。 2 大體形態(tài)：3組均有不同程度的腹腔粘連，以L-OHP組最為顯著；共5例發(fā)生吻合口瘺，其中L-OHP組3例(術(shù)后7d，2例；術(shù)后14d，1例)，L-OHP+GM-CSF組2例(術(shù)后7d，2例；術(shù)后14d，0例)，Control組未發(fā)生吻合口并發(fā)癥，無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.25)。 3 吻合口破裂壓：術(shù)后第7d，L-OHP組與Control組、L-OHP+GM

7、-CSF組之間吻合口破裂壓比較，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；術(shù)后第14d，3組之間吻合口破裂壓無明顯差異(P>0.05)。 4 羥脯氨酸含量：術(shù)后第7d，L-OHP組吻合口組織羥脯氨酸含量最低，與Control組、K-OHP+GM-CSF組比較差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；術(shù)后第14d，3組之間羥脯氨酸含量比較無明顯差異(P>0.05)。 5 Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維含量：術(shù)后第7d，L-OHP組Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維含量顯