七氟醚復(fù)合淺低溫對(duì)大鼠海馬腦片缺氧無(wú)糖損傷的保護(hù)作用.pdf

1、本研究分為二部分： 第一部分 七氟醚復(fù)合淺低溫對(duì)大鼠海馬腦片缺氧無(wú)糖損傷的保護(hù)作用 目的: 利用離體海馬腦片缺氧無(wú)糖(oxygen-glucose deprivation，OGD)損傷模型探討七氟醚(sevoflurane，sev)復(fù)合淺低溫處理對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用。 方法: 大鼠乙醚麻醉后迅速斷頭取腦，低溫分離海馬并沿矢狀面將其切成0.4mm厚的腦片，放入人工腦脊液(ACSF)中孵育備用，孵育好的海馬腦片被隨

2、機(jī)分為6組(n=8)：OGD Ⅰ組，2％sevⅠ組，4％sevⅠ組，OGDⅡ組，2％sevⅡ組，4％sevⅡ組(Ⅰ37℃，Ⅱ 32℃)。2％，4％七氟醚復(fù)合不同溫度在缺氧前14min持續(xù)至缺氧期14min對(duì)海馬腦片進(jìn)行處理，觀察各組OGD損傷期間和復(fù)氧1h后順向群鋒電位(orthodromicpopulation spike，OPS)的變化，并且測(cè)定復(fù)氧1h后孵育液乳酸脫氫酶(Lactatedehydrogenase，LDH)釋放率。

3、 結(jié)果: ①在Ⅰ組中，與OGD Ⅰ組相比，2％sev Ⅰ組和4％sev Ⅰ組OPS消失時(shí)間有延長(zhǎng)趨勢(shì)，OPS恢復(fù)程度和恢復(fù)率有提高趨勢(shì)，LDH釋放率有降低趨勢(shì)；②七氟醚復(fù)合淺低溫后，與OGD Ⅱ組相比，2％sev Ⅱ組和4％sev Ⅱ組OPS消失時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P<0.01)：4％sev Ⅱ組OPS恢復(fù)程度和恢復(fù)率均提高(P<0.05)，LDH釋放率顯著降低(P<0.01) ③ 2％sev Ⅱ組與2％sev Ⅰ組相比，OPS消失時(shí)間

4、延長(zhǎng)(P<0.01)，OPS恢復(fù)程度和OPSt恢復(fù)率有增加趨勢(shì)，LDH釋放率顯著降低(P<0.01)；4％sev Ⅱ與4％sev Ⅰ組相比，OPS消失時(shí)間(P<0.01)、OPS恢復(fù)程度(P<0.05)、OPS恢復(fù)率(P<0.05)以及LDH釋放率(P<0.01)均有差異。 結(jié)論: 4％七氟醚復(fù)合淺低溫處理大鼠海馬腦片后腦保護(hù)效應(yīng)得到強(qiáng)化。 第二部分 七氟醚復(fù)合淺低溫對(duì)大鼠海馬腦片缺氧無(wú)糖損傷細(xì)胞外液氨基酸水平的影響

5、 目的: 在離體海馬腦片缺氧無(wú)糖損傷模型基礎(chǔ)上用高效液相技術(shù)研究七氟醚復(fù)合淺低溫對(duì)海馬腦片OGD損傷細(xì)胞外液氨基酸水平的影響 方法: 孵育好的海馬腦片被隨機(jī)分為6組(n=8)，即OGDⅠ組，2％sev Ⅰ組，4％sev Ⅰ組，OGD Ⅱ組，2％sev Ⅱ組，4％sev Ⅱ組(Ⅰ 37℃，Ⅱ 32℃)。2％，4％七氟醚復(fù)合不同溫度處理下使海馬腦片經(jīng)歷OGD損傷，采用反相高效液相(high-performance liquid

6、 chromatography，HPLC)熒光檢測(cè)法檢測(cè)OGD損傷開(kāi)始之前、OGD結(jié)束即時(shí)、復(fù)氧復(fù)糖30min和60min時(shí)五種氨基酸即天門(mén)冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、?；撬?Tau)、甘氨酸(Gly)和γ-氨基丁酸(GABA)的濃度。 結(jié)果: 在OGD損傷開(kāi)始之前各組五種氨基酸濃度無(wú)明顯差異，OGD損傷結(jié)束之后五種氨基酸濃度均顯著增加(P<0.01)，在Ⅰ組內(nèi)，與OGD Ⅰ組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)相比，2％sevⅠ組和4％sev

7、Ⅰ組OGD結(jié)束后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)Glu、Asp和Gly含量均有降低趨勢(shì)，而Tau和GABA有增加趨勢(shì)更明顯；在Ⅱ組內(nèi)，與OGD Ⅱ組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)相比，2％sev Ⅱ組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)Glu、Asp和Gly含量有降低趨勢(shì)，Tau和GABA含量則有增加趨勢(shì)，4％sevⅡ組G1u和Asp各個(gè)時(shí)間點(diǎn)含量降低(P<0.05)，OGD結(jié)束即時(shí)Tau和OGD結(jié)束后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)GABA含量增加(P<0.05)，Gly含量各個(gè)時(shí)間點(diǎn)有下降趨勢(shì)；而OGD Ⅱ組OGD結(jié)束后

8、各個(gè)時(shí)間點(diǎn)Glu和Asp較OGD Ⅰ組含量降低(P<0.05)，Tau和GABA含量增加(P<0.05)，Gly含量有下降趨勢(shì)。甚至2％sev Ⅱ組與4％sev Ⅰ組比較，Glu、Asp和Gly含量有降低趨勢(shì)而Tau和GABA含量則有升高趨勢(shì)。在同一組內(nèi)比較，Glu、Asp和Gly含量隨著復(fù)氧時(shí)間延長(zhǎng)而有降低趨勢(shì)，而Tau和GABA含量則隨著時(shí)間延續(xù)而有升高趨勢(shì)。 結(jié)論: 4％七氟醚復(fù)合淺低溫后抗海馬腦片OGD損傷作用得到加強(qiáng)，