縮宮素對胎鼠海馬腦片缺氧無糖損傷后OTR、GABAARβ1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究縮宮素(oxytocin，OT)預(yù)處理對胎鼠海馬腦片缺氧無糖損傷后催產(chǎn)素受體(oxytocin receptor，OTR)、γ-氨基丁酸A受體β1亞基(gamma-amimobutyric acidreceptor Aβ1 subunit，GABAARβ1)表達(dá)的影響，探討OT神經(jīng)保護(hù)的作用及機(jī)制。
　　 方法：①研究材料：孕齡20天健康普通級SD孕鼠8只，體重500～800g。②離體胎鼠海馬腦片制備：孕鼠剖宮產(chǎn)娩出胎

2、鼠，迅速剝出胎鼠全腦并切割成厚2-3mm的腦片，置于溫度為(32.0±0.5)℃的人工腦脊液(artificial cerebral spinal fluid，ACSF)中并通入混合氣體95％O2、5％CO2孵育2～3 h備用。③分組與藥物干預(yù)方式：對照組10例海馬腦片經(jīng)正常ACSF孵育后直接行缺氧無糖(oxygen and glucose deprivtion，OGD)15min，實(shí)驗(yàn)組將正常ACSF換成含設(shè)定濃度OT(依次為低10-

3、8mol/L、中10-6mol/L、高10-4mol/L劑量三組各10例)的ACSF孵育，余同對照組。④檢測指標(biāo)：蘇木精-伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining，HE)、透射電子顯微鏡(transmission electronmicroscopy，TEM)觀察海馬CA3區(qū)神經(jīng)元損傷情況，免疫組織化學(xué)法半定量測定該區(qū)域OTR、GABAARβ1表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：①HE染色結(jié)果：對照組海馬CA3區(qū)神經(jīng)

4、細(xì)胞層次變少，排列紊亂、稀疏，部分神經(jīng)細(xì)胞核深染、固縮，核縮小呈梭形或三角形，核仁不明顯；實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)細(xì)胞呈多層排列、數(shù)目多，結(jié)構(gòu)清晰，排列較整齊緊密、分布亦較均勻，神經(jīng)細(xì)胞外形規(guī)則，胞核呈圓形或橢圓形，染色較淡，偶見核深染或固縮，核膜邊界清晰，中劑量組上述改變較低劑量組改善，而高劑量組又優(yōu)于中劑量。②TEM觀察結(jié)果：對照組大量核固縮或碎裂，部分核膜溶解，染色質(zhì)呈團(tuán)塊狀凝集，核仁碎裂，胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器明顯減少，電子密度低；實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞器增多，細(xì)

5、胞核、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體均較對照組有所改善，核膜較光滑，染色質(zhì)細(xì)小而分散，胞漿腫脹較對照組減輕，可見核膜皺褶內(nèi)陷，核固縮，染色質(zhì)凝集、邊集等凋亡現(xiàn)象。③免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組與對照組胎鼠海馬CA3區(qū)OTR免疫組織化學(xué)染色均有陽性反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)組OTR表達(dá)平均光密度值與對照組比較顯著升高(P<0.05)，各劑量亞組間OTR表達(dá)平均光密度值隨OT預(yù)處理濃度梯度上升逐漸升高，組間比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示OTR表達(dá)與OT預(yù)處理

6、濃度呈正相關(guān)。實(shí)驗(yàn)組與對照組海馬CA3區(qū)GABAARβ1免疫組織化學(xué)染色亦均有陽性反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)組GABAARβ1表達(dá)平均光密度值較對照組顯著升高(P<0.05)，中劑量亞組GABAARβ1表達(dá)較低劑量組升高(P<0.05)，中、高劑量組間GABAARβ1表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 結(jié)論：①OT預(yù)處理可減少胎鼠海馬腦片OGD損傷后神經(jīng)元變性、壞死及凋亡，對神經(jīng)元具有保護(hù)作用。②OT上調(diào)胎鼠海馬神經(jīng)元胞膜OTR、GA