Livin和Survivin在成釉細(xì)胞瘤中的表達(dá)和意義.pdf

1、目的：
　　成釉細(xì)胞瘤(ameloblastomas ABs)是發(fā)生于頜骨內(nèi)的牙源性上皮來源的腫瘤，在國內(nèi)其發(fā)生率約占牙源性腫瘤的60％。腫瘤內(nèi)主要含成釉器樣結(jié)構(gòu)，但無釉質(zhì)或其他牙體硬組織形成。大多數(shù)腫瘤發(fā)生于頜骨內(nèi)，常導(dǎo)致頜骨的膨大和面部變形。雖屬良性腫瘤，但其生長具有局部侵襲性，術(shù)后復(fù)發(fā)率較高，也有惡變甚至遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的報(bào)道。WHO2005年新分類將ABs分為4種臨床病理行為不同的變異型，包括:實(shí)性/多囊型、骨外/外周型、促結(jié)締組

2、織增生型和單囊型。這些亞型在患者年齡、部位、影像學(xué)表現(xiàn)以及臨床預(yù)后等方面均存在差異，以往對(duì)于其治療多采用刮除術(shù)，由于其復(fù)發(fā)機(jī)率較大，所以目前多以擴(kuò)大切除術(shù)為主，但仍有小部分患者有復(fù)發(fā)傾向。鑒于本病至今沒有有效的治療方法，因此研究其發(fā)病機(jī)制，尋找抑制腫瘤新的靶點(diǎn)，對(duì)預(yù)防和治療本病有著較重要的意義。目前對(duì)ABs有較多的研究，對(duì)其分子生物學(xué)方面發(fā)病機(jī)制的探討也不斷有報(bào)道，由于其是與牙齒發(fā)育有關(guān)的腫瘤，以往研究發(fā)型凋亡抑制蛋白Livin和Sur

3、vivin參與了牙齒發(fā)育的過程，因此推測(cè)凋亡抑制蛋白Livin和Survivin可能與ASs發(fā)生有一定相關(guān)性。Livin和Survivin是凋亡蛋白抑制因子IAP家族的重要成員，通過不同的途徑抑制細(xì)胞凋亡。以往已證實(shí)了Livin和Survivin參與胚胎的發(fā)育和牙齒的發(fā)生，研究發(fā)現(xiàn)Livin和Survivin的異常誘導(dǎo)了腫瘤的發(fā)生，原因是Livin和Survivin誘導(dǎo)了細(xì)胞凋亡停止，而細(xì)胞增殖，因此產(chǎn)生了異常的新生物。但在成釉細(xì)胞瘤的

4、患者中發(fā)生少之又少。因此本實(shí)驗(yàn)擴(kuò)大樣本量，檢測(cè)Livin和Survivin在成釉細(xì)胞瘤中的表達(dá)，探討成釉細(xì)胞瘤發(fā)生發(fā)展中細(xì)胞凋亡的作用及其與成釉細(xì)胞瘤臨床生物學(xué)行為的關(guān)系。
　　方法：
　　實(shí)驗(yàn)標(biāo)本來自2007年至2012年中國醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)院外科和病理科，新鮮手術(shù)標(biāo)本-86℃凍存。診斷標(biāo)準(zhǔn)依WHO2005分類標(biāo)準(zhǔn)。采取免疫組化SP法、Western-blot法和逆轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription PC

5、R)法分別檢測(cè)ABs中Livin和Survivin蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　一、ABs中Livin免疫組化結(jié)果
　　Livin在ABs中大部分在胞漿表達(dá)，偶見胞核表達(dá)，以中度陽性強(qiáng)陽性為主，位于ABs的外周層及星網(wǎng)狀層細(xì)胞漿中，胞漿陽性為88.7％(71/80)，正?？谇火つど掀ぜ?xì)胞無表達(dá)，在口腔黏膜鱗狀細(xì)胞癌(OSCC)呈陽性表達(dá)。
　　二、ABs中Livin蛋白表達(dá)結(jié)果
　　用Western-blo

6、t方法，以β-tublin做內(nèi)參，檢測(cè)了30例ABs中Livin表達(dá)情況。結(jié)果顯示，Livin在ABs(0.87±0.23)中的表達(dá)明顯高于正常黏膜(0.60±0.05)中的表達(dá)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但在ABs和口腔黏膜鱗狀細(xì)胞癌(OSCC)(0.80±0.07)組織中的表達(dá)無明顯差別(P＞0.05)。
　　三、ABs中Livin基因mRNA表達(dá)結(jié)果
　　用RT-PCR方法，以GAPDH做內(nèi)參，檢測(cè)了30例ABs

7、中Livin的mRNA表達(dá)情況。結(jié)果顯示30例ABs中有18例Livin mRNA表達(dá)（陽性率為60％），而10例口腔黏膜鱗狀細(xì)胞癌OSCC中有5例Livin mRNA表達(dá)（陽性率為50％），10例正常黏膜中僅有2例Livin mRNA表達(dá)（陽性率為20％），Livin的表達(dá)高于正常黏膜，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　四、ABs中Survivin免疫組化結(jié)果
　　Survivin在ABs中有胞漿的表達(dá)，并可見少量的細(xì)

8、胞核表達(dá)，以中度陽性強(qiáng)陽性為主，位于ABs的外周層及星網(wǎng)狀層細(xì)胞漿中，胞漿陽性為90.0％(72/80)，正?？谇火つど掀ぜ?xì)胞無表達(dá)，在口腔黏膜鱗狀細(xì)胞癌(OSCC)呈陽性表達(dá)。
　　五、ABs中Survivin蛋白表達(dá)結(jié)果
　　用Western-blot方法，以β-tublin做內(nèi)參，檢測(cè)了30例ABs中Survivin表達(dá)情況。結(jié)果顯示，Survivin在ABs(0.78±0.12)中的表達(dá)明顯高于正常黏膜(0.49±0

9、.07)中的表達(dá)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但在ABs和口腔黏膜鱗狀細(xì)胞癌(OSCC)(0.71±0.08)組織中的表達(dá)無明顯差別(P＞0.05)。
　　六、ABs中Survivin基因mRNA表達(dá)結(jié)果
　　用RT-PCR方法，以GAPDH做內(nèi)參，檢測(cè)了30例ABs中Survivin的mRNA表達(dá)情況。結(jié)果顯示30例ABs中有20例Survivin mRNA表達(dá)（陽性率為66.7％），而10例口腔黏膜鱗狀細(xì)胞癌OSCC