全胃腸外營養(yǎng)對大鼠腸道TLRS表達(dá)的影響.pdf

1、目的：全胃腸外營養(yǎng)可導(dǎo)致腸粘膜萎縮，腸道免疫屏障損害，腸道細(xì)菌移位，增加感染的發(fā)病率，甚至導(dǎo)致腸源性膿毒血癥，但至今全胃腸外營養(yǎng)導(dǎo)致腸道屏障功能障礙的病因及病理生理機(jī)制仍不明確。近年來，固有性免疫在抵御病原體入侵中的作用越來越受到重視，Toll樣受體（TLRs）作為固有免疫模式識別受體中最重要的成員之一，在固有免疫中起著決定性作用并最終激活適應(yīng)性免疫，而目前國內(nèi)及國外報(bào)道有關(guān)全胃腸外營養(yǎng)導(dǎo)致TLRs表達(dá)改變的文獻(xiàn)不多。本課題即利用RT-

2、PCR技術(shù)，檢測TPN后腸道Toll樣受體表達(dá)的變化，探討其在TPN相關(guān)腸道粘膜免疫損害中的作用，應(yīng)用ω-3魚油脂肪乳干預(yù)，觀察其改善腸道粘膜屏障的作用，為臨床預(yù)防和治療TPN相關(guān)并發(fā)癥提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
　　 材料與方法：選擇18只SPF級雄性SD大鼠隨機(jī)分為3組，分別為生理鹽水組，TPN組，魚油組。商品化鼠糧喂養(yǎng)，自來水龍頭供水，維持12：12小時(shí)晝夜循環(huán)，溫度維持在22℃左右，相對濕度40％～60％。各組大鼠麻醉成功后，無菌

3、環(huán)境下經(jīng)右頸靜脈置入硅膠管后予進(jìn)食進(jìn)水兩天以利于從手術(shù)應(yīng)激中恢復(fù)。第3天起即通過恒流微泵持續(xù)輸液一周：生理鹽水組予輸注生理鹽水，同時(shí)進(jìn)食進(jìn)水；TPN組予輸注TPN（配方組成詳見表1）；魚油組TPN中脂肪乳更換為ω-3魚油脂肪乳注射液，TPN組及魚油組大鼠輸液期間禁食禁水。各組輸液量均為第1天20ml，第2天40ml，第3～7天為60ml。經(jīng)上述處理后，所有大鼠頸椎脫臼法快速處死取小腸近端1/3，中間段1/3及遠(yuǎn)端1/3組織，用RT-PC

4、R方法檢測所取小腸組織中TLR2，3，4，5，7，9的表達(dá)水平.
　　 結(jié)果：PCR結(jié)果顯示TLR2，3，4，5，7，9在大鼠近端，中間段及遠(yuǎn)端小腸組織中均有表達(dá)，全胃腸外營養(yǎng)后大鼠近端及中間段小腸組織TLRs4，5，7，9表達(dá)水平顯著上調(diào)，遠(yuǎn)端小腸組織TLRs2，3，4，5，7，9表達(dá)水平均顯著上調(diào)；而魚油組近端及中間段小腸組織TLRs4，5，7，9表達(dá)水平較TPN組顯著下調(diào)，魚油組遠(yuǎn)端小腸組織TLRs2，3，4，5，7，9表