采用組織芯片技術(shù)研究人類β-防御素在聲帶息肉中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的： 運(yùn)用現(xiàn)代免疫組織化學(xué)染色方法，利用組織芯片這一新技術(shù)，檢測(cè)人類β-防御素1(humanbeta-defensin1，hBD-1)、人類β-防御素2(humanbeta-defensin2，hBD-2)在聲帶息肉組織中的表達(dá)，探討兩者之間有無(wú)關(guān)聯(lián)，分析它們?cè)诼晭⑷獍l(fā)病機(jī)理中的作用。 方法： 構(gòu)件布有實(shí)驗(yàn)組聲帶息肉51例，對(duì)照組聲帶結(jié)節(jié)26例以及正常聲帶組織標(biāo)本8例共85例有效樣本的組織芯片，進(jìn)行hBD-1

2、、hBD-2的S-P免疫組織化學(xué)染色法，觀察hBD-1、hBD-2的表達(dá)情況，運(yùn)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件分析其表達(dá)率、表達(dá)強(qiáng)度及聯(lián)合表達(dá)情況，做Krusal-Wallis檢驗(yàn)及相關(guān)性檢驗(yàn)，計(jì)算出P值(取P<0.05為差異有顯著性)。 結(jié)果： 1)組織芯片蠟塊表面及四周無(wú)裂開現(xiàn)象，蠟質(zhì)細(xì)膩均勻，組織點(diǎn)列陣模塊排列整齊，切片后可見組織例數(shù)/點(diǎn)樣例數(shù)=85/105。經(jīng)HE染色后，見組織芯排布均勻，雖有個(gè)別組織點(diǎn)發(fā)生了脫片、易

3、位和皺折，但組織學(xué)可觀測(cè)率仍為98％以上。每一組織點(diǎn)中均可見具有診斷意義的上皮組織結(jié)構(gòu)。在可供評(píng)價(jià)的85例中，組織芯片與常規(guī)組織切片hBD-2的表達(dá)符合率為95.29％(81/85)，二者的表達(dá)在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著差異(P>0.05)。 2)hBD-1在實(shí)驗(yàn)組和兩對(duì)照組中均以低表達(dá)為主，實(shí)驗(yàn)組(聲帶息肉組)陽(yáng)性率96.08％(49/51)，陰性率3.92％(2/51)；對(duì)照組：聲帶結(jié)節(jié)組：陽(yáng)性率96.16％(25/26)，陰性率3.

4、84％(1/26)，正常聲帶組：陽(yáng)性率87.5％(7/8)，陰性率12.5％(1/8)，三者之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；聲帶息肉組中，男性陽(yáng)性率為95.6％(22/23)，女性陽(yáng)性率為96.4％(27/28)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3).hBD-2在兩對(duì)照組表達(dá)較少，但在實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)表達(dá)明顯增高，實(shí)驗(yàn)組(聲帶息肉組)陽(yáng)性率100％(51/51)，陰性率0％(0/51)；對(duì)照組：聲帶結(jié)節(jié)組：陽(yáng)性率23.08％

5、(6/26)，陰性率76.92％(20/26)，正常聲帶組：陽(yáng)性率25％(2/8)，陰性率75％(6/8)，三者之間陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而各組之間進(jìn)行Mann-WhitneyU檢驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)組與兩對(duì)照組之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.017)，而兩對(duì)照組聲帶結(jié)節(jié)組與正常聲帶組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.017)。同時(shí)實(shí)驗(yàn)組與兩對(duì)照組相比hBD-2有著更高程度的表達(dá)，以++為分界(如表2)，實(shí)驗(yàn)組高表達(dá)的為62.75％(

6、32/51)，對(duì)照組：聲帶結(jié)節(jié)組為0％(0/26)，正常聲帶組為0％(0/8)，三者間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。聲帶息肉組中，男性陽(yáng)性率為100％(23/23)，女性陽(yáng)性率為100％(28/28)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 4)聲帶息肉組hBD-1和hBD-2的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.433，P=0.017<0.05)。 結(jié)論： 1)hBD-1在實(shí)驗(yàn)組和兩對(duì)照組中均為低強(qiáng)度表達(dá)，且三組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)