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文檔簡介
1、本研究的目的是探討白藜蘆醇抑制膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠(collagen-inducedarthritis in rats,CIA)滑膜細胞環(huán)氧合酶-2(COX-2)對抗炎作用的影響. 方法: Wistar大鼠70只,雌雄各半,根據(jù)性別匹配選取6只作為實驗正常對照組,其余CIA造模。造模第30天,取關(guān)節(jié)炎指數(shù)>4分、Larsen評分>1分42只造模成功的大鼠納入研究,隨機分7組:模型對照組、來氟米特陽性藥對照組、白芍總甙陽性藥對照
2、組、甲氨喋呤陽性藥對照組、白藜蘆醇低劑量組、中劑量組以及高劑量組,分別簡稱A、B、C、D、E、F、G組。除正常大鼠外,其他模型動物自由攝食外,通過灌胃給藥,具體給藥劑量為來氟米特6mg/kg·d、白芍總甙50mg/kg·d、甲氨喋呤25mg/kg·w、白藜蘆醇低劑量10mg/kg·d、白藜蘆醇中劑量50mg/kg·d、白藜蘆醇高劑量100mg/kg·d,模型對照組給予同體積的生理鹽水,共持續(xù)28天。每周肉眼觀察足腫脹指數(shù)和進行關(guān)節(jié)炎指數(shù)
3、(AI)評分,第60天取死大鼠制備關(guān)節(jié)軟骨和滑膜病理切片,經(jīng)顯微鏡檢查對關(guān)節(jié)、滑膜炎癥進行病理學(xué)評分;用免疫組織化學(xué)法檢測關(guān)節(jié)滑膜細胞環(huán)氧合酶(COX-2)蛋白表達,探討其作用靶點。所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。 結(jié)果: 1.CIA關(guān)節(jié)炎指數(shù)評分:①給藥前與正常對照組(0.50±0.55)比較分析,A組(9.17±0.98)、B組(9.00±0.89)、C組(9.33±1.03)、D組(8.50±0.84)及E組(9.17±1.
4、17)、F組(9.00±0.89)、G組(9.17±0.75),其關(guān)節(jié)指數(shù)評分顯著增高,差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001);②給藥后與A組(12.83±0.41)比較:B組(4.67±0.52)、C組(8.83±0.75)、D組(6.33±0.52)、及F組(8.17±0.98)、G組(6.00±0.63)的關(guān)節(jié)指數(shù)評分顯著降低其差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);③給藥后與B組(4.67±0.52)比較:E組(12.33±0.52)
5、、F組(8.17±0.98)、G組(6.00±0.63)關(guān)節(jié)炎指數(shù)評分升高,其差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。④給藥后F組(8.17±0.98)、G組(6.00±0.63)大鼠關(guān)節(jié)指數(shù)低于E組(12.33±0.52),其差值均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001);且F組(8.17±0.98)與G組(6.00±0.63)關(guān)節(jié)指數(shù)差值有統(tǒng)計學(xué)意義fP 6、相比,A組(2.53±0.28)足爪容積增大,其差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P 7、、G組(1.82±0.02)足爪容積變小其差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001);④在給藥實驗過程中,白藜蘆醇的給藥劑量與足爪容積變化有顯著相關(guān)性。 3.CIA關(guān)節(jié)滑膜炎的病理評分比較:①與A組(6.5±0.43)病理評分分數(shù)比較,B組(2.33±0.33)、C組(4.83±0.48)、D組(2.33±0.33)、E組(4.17±0.48)、F組(3.67±0.33)、G組(2.83±0.33)的分數(shù)差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.0 8、1)。②與陽性藥物組相比,D組(2.33±0.33)、B組(2.33±0.33)病理評分均低于E組(4.17±0.48)、F組(3.67±0.33)(P<0.05)。而B組(2.33±0.33)、D組(2.33±0.33)、G組(2.83±0.33)的評分分數(shù)相比其差別無顯著性(P>0.05);E組(4.17±0.48)與C組(4.83±0.48)的病理評分分數(shù)的差別無顯著性(P>0.05);③實驗藥物不同劑量組比較:E組(4.17±0 9、.48)與G組(2.83±0.33)之間的病理評分分數(shù)相比其差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 4.CIA關(guān)節(jié)滑膜細胞COX-2蛋白表達比較:①與A組比較,B組(22.30±2.94)、C組(48.92±2.25)、D組(23.73±2.88)、E組(36.48±0.97)、F組(26.02±1.55)、G組(21.98±1.34)的滑膜細胞COX-2蛋白的表達顯著低于A組(56.23±2.81)(P<0.05);②與陽性藥物組 10、相比,F(xiàn)組(26.02±1.55)、G組(21.98±1.34)與B組(22.30±2.94)、D組(23.73±2.88)的滑膜細胞COX-2蛋白的表達差異無顯著性(P>0.05),但均顯著低于C組(48.92±2.25)(P<0.001);③實驗藥物不同劑量組比較:F組(26.02±1.55)、G組(21.98±1.34)滑膜細胞COX-2蛋白的表達顯著低于E組(36.48±0.97) (P<0.01)。 5.CIA關(guān)節(jié)滑 11、膜細胞COX-2蛋白表達的陽性細胞率與關(guān)節(jié)病理評分之間的相關(guān)分析:COX-2陽性細胞率與病理評分,兩者之間存在正相關(guān)關(guān)系,r=0.745,P<0.001。 結(jié)論:白藜蘆醇對CIA關(guān)節(jié)滑膜炎癥有抗炎作用,其作用強度大于藥用劑量的白芍總甙,但弱于藥用甲氨喋呤或來氟米特。白藜蘆醇具有抑制CIA關(guān)節(jié)滑膜細胞COX-2蛋白表達的作用,在一定范圍內(nèi)與劑量成正相關(guān),其抑制能力與病理評分呈正相關(guān);提示白藜蘆醇抑制關(guān)節(jié)滑膜細胞COX-2的產(chǎn)生,是
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