PPARγ在大鼠膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎滑膜中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:觀察大鼠膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎模型(CIA)滑膜組織中過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)的表達(dá)情況,以及PPARγ激動劑羅格列酮對 NF-κB、TNF-α、IL-1β表達(dá)的影響,探討類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎臨床治療的新靶點(diǎn)。
　　方法:(1)健康雄性 Sprague Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為2組:正常對照組、造模組,造模組中又分為模型組、給

2、藥7天組、對照7天組、給藥14天組、對照14天組。光鏡觀察滑膜組織形態(tài);免疫組織化學(xué)法檢測滑膜組織中PPARγ和NF-κB的蛋白表達(dá)情況;半定量反轉(zhuǎn)錄 PCR檢測大鼠滑膜 PPARγmRNA表達(dá)水平;ELISA法測定大鼠外周血中TNF-α和IL-1β的含量。(2)所有數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析。
　　結(jié)果:(1)大鼠膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎模型的評估:于造模后第21天進(jìn)行關(guān)節(jié)炎指數(shù)評分,造模組與正常組關(guān)節(jié)炎評分比較,P<0.0

3、5,兩組有顯著差異;(2)病理形態(tài)學(xué)檢查顯示:正常對照組中,滑膜由1～2層滑膜細(xì)胞組成,無增生,細(xì)胞排列整齊,滑膜組織中無炎性細(xì)胞浸潤;造模組中,滑膜細(xì)胞水腫,有3～5層增生,細(xì)胞排列不整齊,滑膜組織中有大量的炎性細(xì)胞浸潤;(3)免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:PPARγ表達(dá)的細(xì)胞定位為細(xì)胞漿,棕黃色顆粒為陽性,正常組滑膜組織染色為陰性;模型組、對照7天組、對照14天組滑膜組織染色為弱陽性～中等陽性;給藥7天組、給藥14天組滑膜組織染色為中等陽性

4、～強(qiáng)陽性。給藥14天組表達(dá)程度最高,陽性率83.33％,多為++～+++;給藥7天組陽性率66.67％,多為+～++;模型組、對照7天組、對照14天組陰性和弱陽性表達(dá)居多。NF-κB表達(dá)的細(xì)胞定位為細(xì)胞漿,棕黃色顆粒為陽性,正常組滑膜組織染色為陰性;模型組、對照7天組、對照14天組滑膜組織染色為中等陽性～強(qiáng)陽性;給藥7天組、給藥14天組滑膜組織染色為陰性～中等陽性。模型組表達(dá)程度最高,陽性率75.00％,多為++～+++;給藥7天組陽性

5、率33.33％,多為+～++;(4)反轉(zhuǎn)錄 PCR檢測結(jié)果顯示:造模后 PPARγmRNA的表達(dá)增加;造模組中,給藥7天與14天相比,隨著給藥時(shí)間延長,PPARγmRNA的表達(dá)也隨之增加;與正常組比較,模型組 P<0.05;與給藥7天組比較,對照7天組 P<0.05;與給藥14天組比較,對照14天組 P<0.05;與模型組比較,給藥各組 P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;(5) ELISA法檢測結(jié)果顯示:給藥組與造模組相比,大鼠外周血 TNF

6、-α和IL-1β的水平明顯降低,即:與正常組比較,模型組 P<0.05;與給藥7天組比較,對照7天組 P<0.05;與給藥14天組比較,對照14天組 P<0.05;與模型組比較,給藥各組 P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:大鼠膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎模型是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎基礎(chǔ)研究較為理想的動物模型。造模成功后,大鼠滑膜組織 PPARγ的表達(dá)上調(diào),給予 PPARγ激動劑羅格列酮后, PPARγ蛋白的表達(dá)水平與 PPARγmRNA的表達(dá)均增