抗HER2納米抗體五聚物的構建與功能研究.pdf

1、HER2為表皮生長因子受體超家族成員，是人類腫瘤中發(fā)生改變頻率最高的原癌基因之一。其基因表達水平和基因拷貝數(shù)目在幾種人類腫瘤細胞中都有顯著升高，特別是在乳腺癌、卵巢癌和胃癌中升高更為顯著。HER2在乳腺癌和許多其他癌癥中的過表達伴隨著很多預后不良反應如腫瘤進展快，易復發(fā)，這使得HER2成為理想的抗腫瘤免疫治療的靶標?？笻ER2抗體能夠通過干擾HER2這種腫瘤生長過程中的重要媒介誘導抗腫瘤效應，也可以作為靶向分子用來轉運治療藥物至HER2

2、過表達的腫瘤細胞表面，這構成了抗體依賴性療法的基礎。
　　 1.抗HER2單域抗體目前,已開發(fā)了多種靶向 HER2抗體藥物,包括抗HER2 單鏈抗體scFv。scFv 抗原識別特異性強，易于基因工程大量生產，但是其相對復雜的分子結構，仍然具有免疫原性，結構的不穩(wěn)定性，和構建方法的繁瑣大大限制了其在醫(yī)療領域的應用。單域抗體也稱納米抗體，其輕鏈缺失，僅由兩條重鏈構成。相比而言，分子結構更簡單，尺寸更小，更穩(wěn)定，親和力更高，免疫原性更

3、低，更易表達純化。
　　 納米抗體的上述優(yōu)勢使其在腫瘤靶向性治療方面具有更大的應用前景。應用噬菌體篩選技術，我們從單域抗體文庫中篩選出高親和力的抗HER2單域抗體，并測定其基因序列。
　　 2.納米抗體五聚物Vero毒素，或志賀氏桿菌樣毒素，是一種AB5型毒素，其中B亞基能自組裝成五聚體，是一種良好的自組裝單位。將單域抗體與大腸桿菌Vero毒素B亞基（VTB）融合，VTB-sdAb自組裝，從而構建出同形五聚物即納米抗體五