端粒酶及血清游離HER2在胃癌HER2靶向治療中的生物學(xué)意義.pdf

1、胃癌是世界范圍內(nèi)常見的消化道惡性腫瘤，目前發(fā)病率仍居惡性腫瘤發(fā)病率第五位，死亡率位居第三位，我國是胃癌大國，年新發(fā)病例和死亡病例數(shù)分別占全球的42％和35％。異質(zhì)性較高、腫瘤分期晚、綜合治療療效有限使胃癌患者的整體預(yù)后較差，胃癌防治任重道遠(yuǎn)。HER2靶向治療在胃癌的成功應(yīng)用標(biāo)志著胃癌診療的巨大的進(jìn)步，但是在臨床應(yīng)用過程中仍存在腫瘤對HER2靶向治療反應(yīng)率不高，缺乏簡便的監(jiān)測手段等問題。探尋影響胃癌HER2靶向治療療效的分子機(jī)制、尋找合適

2、的監(jiān)測手段，以及針對性開發(fā)新型干預(yù)措施，對于提升胃癌HER2治療療效非常重要，是當(dāng)前胃癌研究熱點(diǎn)之一。
　　目的:
　　以端粒酶活性為切入點(diǎn)，分析胃癌細(xì)胞中的HER2表達(dá)與端粒酶之間的相關(guān)性，確定端粒酶活性是否對HER2靶向治療療效產(chǎn)生影響;在不同類型的細(xì)胞中，通過正向和反向的調(diào)節(jié)干預(yù)，深入分析端粒酶活性與HER2之間的相互調(diào)控關(guān)系;觀察靶向治療對胃癌細(xì)胞的增殖、凋亡、自噬、細(xì)胞周期等生物學(xué)行為的影響，進(jìn)一步了解靶向治療的內(nèi)

3、在機(jī)制;探尋新的檢測HER2的手段，為HER2靶向治療的應(yīng)用提供參考依據(jù)。
　　方法:
　　選取不同HER2表達(dá)水平的胃癌細(xì)胞系為模型，以拉帕替尼(Lapatinib)為靶向HER2的主要措施，分別通過WB、rtPCR、TRAP等方法檢測HER2，hTERT,端粒酶活性在胃癌中的水平及相關(guān)性;通過siRNA干擾、藥物處理、穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的方式正向和反向的調(diào)節(jié)干預(yù)HER2或端粒酶活性，觀察兩者之間的調(diào)控關(guān)系，并通過CCK8實(shí)驗(yàn)，分析

4、端粒酶活性對HER2靶向治療效果的影響;應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)等觀察Lapatinib聯(lián)合化療過程中對細(xì)胞周期、凋亡、自噬等細(xì)胞現(xiàn)象的影響;運(yùn)用系統(tǒng)綜述和Meta分析的手段分析血清HER2診斷HER2陽性胃癌患者的準(zhǔn)確性和指導(dǎo)胃癌HER2靶向治療的可行性。
　　結(jié)果:
　　(1)胃癌細(xì)胞中HER2表達(dá)水平與端粒酶活性存在正相關(guān)關(guān)系，Lapatinib可通過干擾hTERT的轉(zhuǎn)錄降低TA活化，從而抑制NCI-N87細(xì)胞生長，端粒酶活性

5、改變影響了NCI-N87細(xì)胞對拉帕替尼的敏感性，而端粒酶抑制劑BIBR1532能夠增敏NCI-N87細(xì)胞和SGC7901細(xì)胞對拉帕替尼的敏感性。(2)高表達(dá)外源性hTERT誘導(dǎo)2BS細(xì)胞永生化能夠上調(diào)HER2表達(dá)水平，并且在HepG2細(xì)胞中，siRNA沉默hTERT,BIBR1532處理和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染端粒酶抑制因子蛋白能抑制HER2表達(dá)。(3)拉帕替尼能增加奧沙利鉑誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞的凋亡率及增強(qiáng)對胃癌細(xì)胞S期阻滯能力。(4) Lapatinib

6、處理過程中，NCI-N87細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞自噬、CD44+細(xì)胞增多和端粒酶活性增強(qiáng)等現(xiàn)象，增加了其耐藥性。(5) Meta分析顯示血清HER2診斷HER2陽性胃癌的合并靈敏度為0.39(95％CI:0.21-0.61)，合并的特異度為0.98(95％CI:0.87-1.00)。合并的PLR和NLR分別為16.6(95％ Cl:4.5-61.5)和0.62(95％ Cl:0.46-0.85)。SROC下面積為0.77(95％Cl:0.73-0

7、.80)和DOR值為27(95％ CI:9-81)。
　　結(jié)論:
　　(1)端粒酶活性與HER2表達(dá)存在一定相關(guān)性，在腫瘤發(fā)生及腫瘤治療過程中相互調(diào)節(jié)和影響，聯(lián)合應(yīng)用端粒酶抑制劑和HER2靶向治療有望進(jìn)一步提高腫瘤治療效果。(2) Lapatinib處理過程中，NCI-N87細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞自噬、CD44+細(xì)胞增多和端粒酶活性增強(qiáng)等現(xiàn)象，為進(jìn)一步理解腫瘤耐藥性提供一定基礎(chǔ)。(3)血清HER2有望成為一種篩查胃癌中HER2表達(dá)情況