黃白抑瘤方對人直腸癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的: 大腸癌是目前最常見惡性腫瘤之一，近年來我國的大腸癌的發(fā)病率呈上升趨勢。祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為直腸癌的形成是濕熱蘊(yùn)結(jié)日久化毒下注，積聚于腸道凝結(jié)而成腫瘤。濕熱下注、火熱內(nèi)蘊(yùn)、結(jié)而為腫是病之標(biāo)；正氣不足、脾腎兩虧為病之本。中醫(yī)藥治療大腸癌是目前國內(nèi)腫瘤治療領(lǐng)域一大優(yōu)勢，大量實(shí)驗(yàn)及臨床案例證明，中醫(yī)藥輔助治療可以有效減輕放化療副作用。我們在臨床研究中，按照清熱解毒、益氣養(yǎng)陰、活血燥濕的治療原則，用黃白抑瘤方口服及局部治療該病取得了較好的

2、臨床療效。在本實(shí)驗(yàn)中，我們擬采用人結(jié)直腸癌細(xì)胞株Colo320為研究對象，觀察黃白抑瘤方在體外對Colo320細(xì)胞的抗腫瘤作用研究，探討黃白抑瘤方對Colo320細(xì)胞增殖、凋亡，及其相關(guān)蛋白表達(dá)的影響，以明確黃白抑瘤方治療結(jié)直腸癌的生物學(xué)基礎(chǔ)。 方法: 使用不同濃度黃白抑瘤方體外干預(yù)Colo320細(xì)胞。采用甲基噻唑MTT比色法和生長曲線測定不同濃度黃白抑瘤方對Colo320細(xì)胞的增殖的影響。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測不同濃度黃白

3、抑瘤方對Colo320細(xì)胞周期和凋亡率的影響，并與對照組細(xì)胞的凋亡率比較，以顯示黃白抑瘤方作用與細(xì)胞凋亡率之間的關(guān)系；Western blot檢測不同濃度黃白抑瘤方處理后Colo320細(xì)胞的增殖細(xì)胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen，PCNA)，以及凋亡相關(guān)蛋白Caspase3和PARP的表達(dá)。 結(jié)果: 黃白抑瘤方作用Colo320細(xì)胞24h后，經(jīng)MTT法檢測，OD值明顯小于對照

4、組，顯示不同濃度藥物具有不同程度的腫瘤抑制率；黃白抑瘤方作用Colo320細(xì)胞48h后，與對照組相比，細(xì)胞周期分布發(fā)生明顯改變，表現(xiàn)為S期細(xì)胞比例下降，G0/G1期和G2/M期細(xì)胞比例上升，凋亡率明顯升高；黃白抑瘤方作用Colo320細(xì)胞48h后，與對照組相比，PCNA含量顯著減少，而凋亡相關(guān)蛋白Caspase3和PARP含量顯著增加。 結(jié)論: 黃白抑瘤方能抑制人直腸癌Colo320細(xì)胞增殖，并誘導(dǎo)促進(jìn)細(xì)胞凋亡，從而達(dá)到