RNA螺旋酶DHX32對結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響.pdf

1、RNA螺旋酶在RNA加工過程中發(fā)揮重要作用，能夠利用水解NTP產(chǎn)生的能量參與前mRNA剪接、翻譯起始、mRNA轉(zhuǎn)運(yùn)、核蛋白體生成、RNA降解以及線粒體和細(xì)胞核內(nèi)RNA轉(zhuǎn)錄后加工等生物學(xué)過程。根據(jù)RNA螺旋酶結(jié)構(gòu)域基序氨基酸殘基序列的不同，RNA螺旋酶分為DHX和DDX兩個家族。已有研究表明多種RNA螺旋酶在腫瘤中表達(dá)失調(diào)，部分RNA螺旋酶參與細(xì)胞分化、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、癌基因表達(dá)和腫瘤耐藥基因表達(dá)的調(diào)控。DHX32是一種新的RNA螺旋

2、酶，屬于DHX家族，在急性淋巴細(xì)胞白血病中低表達(dá)。先前我們的研究首次報道了DHX32基因在結(jié)直腸癌組織中高表達(dá)，并且與結(jié)直腸癌的發(fā)生部位、組織學(xué)分級、癌栓形成、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和DUKES分期密切相關(guān)。然而，DHX32在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展中的生物學(xué)功能和分子機(jī)制并不清楚。
　　在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)DHX32在結(jié)直腸癌細(xì)胞株中高表達(dá)。為了進(jìn)一步研究DHX32在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用，我們分別構(gòu)建了DHX32沉默和DHX32過表達(dá)的結(jié)直腸癌

3、細(xì)胞株來進(jìn)行細(xì)胞功能方面的研究。首先我們用了CCK-8，BrdU和細(xì)胞克隆形成實驗三種實驗方法來研究DHX32在結(jié)直腸癌細(xì)胞SW480和HCT-8細(xì)胞增殖方面的影響。結(jié)果顯示DHX32沉默后抑制了SW480和HCT-8細(xì)胞的增殖和克隆形成能力。接著我們又用了transwell的方法研究了DHX32對SW480和HCT-8細(xì)胞遷移和侵襲的影響。結(jié)果顯示，與對照組相比DHX32沉默后SW480和HCT-8的細(xì)胞遷移和侵襲能力明顯降低。我們又

4、做了細(xì)胞劃痕愈合實驗進(jìn)一步驗證DHX32對SW480細(xì)胞遷移能力的影響，結(jié)果正如我們預(yù)想的那樣，DHX32沉默后SW480的細(xì)胞愈合能力明顯下降。為了進(jìn)一步明確我們的實驗結(jié)果的可靠性，我們成功構(gòu)建了SW480細(xì)胞的DHX32過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株，用該細(xì)胞株做了細(xì)胞增殖，遷移和侵襲實驗。結(jié)果顯示DHX32過表達(dá)之后促進(jìn)了SW480細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，與上述沉默細(xì)胞株所得結(jié)果相吻合。最后，我們初步探討了可能的分子機(jī)制。我們的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，將