甲基硒酸對人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981增殖和細胞周期的影響及其分子機制的研究.pdf

1、背景與目的：肺癌是當今世界上對人類健康和生命危害最大的惡性腫瘤。近半個世紀以來，盡管各種肺癌治療手段不斷發(fā)展，但遺憾的是包括我國在內(nèi)的絕大多數(shù)國家肺癌的療效并無明顯提高，肺癌總的治愈率仍低于15％。因此研究和開發(fā)抗肺癌的有效新藥物仍是腫瘤領域的重要任務。自20世紀70年代以來，人們逐漸注意到必需微量元素硒及其化合物的防癌抗癌作用。國內(nèi)外學者進行了大量的流行病學研究和基礎研究，發(fā)現(xiàn)硒及其不同形式的化合物能夠降低包括肺癌在內(nèi)多種腫瘤的發(fā)病率

2、，也能夠明顯抑制乳腺癌、前列腺癌等細胞株體外增殖能力，并可以通過多種機制導致癌細胞周期阻滯而影響細胞增殖。這無疑也為開發(fā)抗肺癌新藥提供了新的思路。目前在硒的體外研究中，甲基硒酸（methylseleninic acid，MSA）可能是最有希望的硒化合物。因為被細胞攝取后，MSA可以通過非β裂解酶途徑（β裂解酶在體外細胞中表達水平受限），持續(xù)穩(wěn)定地轉化為甲基硒（甲基硒抑制細胞生長的能力最強，但該化合物非常不穩(wěn)定），故MSA的抗癌效能強于其

3、他依賴于β裂解酶代謝途徑的硒化合物，如無機硒化合物或硒-甲基硒代半胱氨酸等。 迄今，有關甲基硒酸對人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981的抗癌作用及其分子機理的研究國內(nèi)外均無報道。故本研究應用MSA處理人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981，旨在初步探討甲基硒酸對人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981是否具有生長抑制、細胞周期阻滯作用及其可能的分子機制。 方法：本研究應用體外細胞培養(yǎng)技術，通過臺盼藍計數(shù)法觀察MSA對人高轉移大細胞肺

4、癌細胞株L9981生長曲線的影響，平板法克隆形成實驗觀察MSA對L9981肺癌細胞株克隆形成能力的影響，流式細胞術檢測MSA對L9981肺癌細胞株細胞周期分布的影響以及周期相關基因p53和p21表達水平的變化。 結果：本研究在國內(nèi)外首次觀察到：（1）MSA可顯著抑制人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981的體外增殖能力，并具有劑量依賴性，0.5、2.5、5.0和7.5μmol/LMSA組L9981細胞株的體外增殖能力均顯著低于對照組（

5、P＜0.05或P＜0.01）；5.0μmol/L MSA抑制L9981細胞株體外增殖能力的作用類似于2.5μg/mlDDP（8.3μmol/L DDP）的抑制作用；（2）MSA濃度在2.5、5.0和7.5μmol/L時可顯著抑制L9981的克隆形成能力（P＜0.05），并具有劑量依賴性；（3）MSA能將人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981阻滯在G1/G0期，MSA的這種阻滯作用具有時間依賴性；（4）MSA能將人高轉移大細胞肺癌細胞株L99

6、81阻滯在G2/M期，MSA的這種阻滯作用具有劑量依賴性；（5）MSA能顯著上調(diào)人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981 p53和p21表達水平（P＜0.01），并具有明顯的劑量依賴性。 結論：（1）MSA可顯著抑制人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981的體外增殖能力，并具有劑量依賴性，可將細胞阻滯于G0/G1期和G2/M期；（2）MSA可顯著抑制L9981肺癌細胞株的體外克隆形成能力，并呈劑量依賴性；（3）MSA的抗肺癌作用可能與其上調(diào)